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南方科技大学公共卫生及应急管理学院2026级博士研究生招生报考通知(长期有效)
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zhengdan9298

金虫 (正式写手)

[求助] 稀释液不一样,出峰不一样

一β内酰胺化合物,pH值大概在5到6之间
A:乙腈
B:0.01%磷酸
流动相梯度如下
time        Solvent A        Solvent B        Flow(ml/min)
0        10        90        1
5        10        90        1
10        30        70        1
15        50        50        1
20        70        30        1
25        10        90        1
30        10        90        1
稀释液为60%ACN(aq)时,见图1,t=3.8min,91.1%,t=8.0min,8.8%
稀释液为20%ACN(aq)时,见图2,t=7.2min,53.8%,t=7.8min,46.0%
稀释液为纯化水,见图3,t=7.7min,99.8%
总结结果:随着乙腈增多,主峰7.9min减小,其他产物增多,但是其他产物保留时间随乙腈增多而提前。
请教各位,为什么随着乙腈的增大,7.9min的主峰减小,是转换成什么物质了吗?有没有可能是一种是离子状态,一种是分子状态?如果是的话,那为什么60%ACN的是在3.8min,而20%ACN的在7.2min。不解?求各位帮忙啊
稀释液不一样,出峰不一样
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稀释液不一样,出峰不一样-1
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稀释液不一样,出峰不一样-2
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tianxia119wo

金虫 (正式写手)

我上个月也遇到了同样的问题,(*^__^*) 嘻嘻……,度娘还是很厉害的.
浙大化学系本科生,希望能和各位虫友多多交流,互相帮助.
4楼2013-09-21 18:41:41
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tianxia119wo

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个你去百度一下就有了,稀释液要和你的流动相就可能相同,尤其是当你的无知出峰时间比较早,流动相来不及完全稀释样品,就已经出峰了,就会出现双峰,(可以去搜索一下百度出双峰的原因)
浙大化学系本科生,希望能和各位虫友多多交流,互相帮助.
2楼2013-09-21 18:36:45
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tianxia119wo

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


zhengdan9298: 金币+1 2013-09-22 20:16:09
目前hplc分析多为反相色谱,流动相多为甲醇、乙腈、水,加各种添加剂以改善分离性能。样品一般用与流动相相溶的溶剂溶解。最佳的溶解方法是用流动相溶解,但是很多情况是不一致的。当用溶剂极性强度大的试剂,如纯甲醇、纯乙腈,纯乙醇,而分析体系中以水为主,样品进样量大,如定量管为20ul,此条件下完全可以肯定,单一的纯物质出双峰,第二峰比第一峰小(每次都不太一样),且拖尾,保留时间会提前(相对进样量少而言),将进样量减少一半以上,峰型将变为正常。这是样品的溶剂与流动相极性相差太大,而流动相来不及将其稀释达到平衡造成的。上面提到进样量造成双峰的一个原因,另一个原因是,进样量不一定大,但绝对量很大,色谱图上的双峰紧靠在一起,基本上齐高,不拖尾(如果出峰很快,也可能是色谱柱问题)。将样品稀释再进样就可以了,这是由于进样量过大,色谱柱过载造成的。
浙大化学系本科生,希望能和各位虫友多多交流,互相帮助.
3楼2013-09-21 18:40:51
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tianxia119wo

金虫 (正式写手)

楼主当你考虑降解、解离之类的原因,可以通过时间变量来考察,而不是通过稀释液的比例不同来考察.
浙大化学系本科生,希望能和各位虫友多多交流,互相帮助.
5楼2013-09-21 18:44:11
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