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月亮先生

金虫 (小有名气)

[交流] 产物相近，是不是要对内参换引物了。

最近要做半定量PCR，想摸索内参和目的基因在同一个pcr管中一起扩增的情况。
如图“2013-9-16 ”，所上样的处理分别为。基因P三个泳道，基因GAPDH三个泳道，基因C三个泳道（其中基因GAPDH是内参基因），Marker三个泳道，基因P和G放在相同PCR管中一起扩增三个泳道（用P'G'表示），基因C和基因G一起放在相同PCR管中一起扩增三个泳道（用C'G'表示）。

用BIORAD的仪器读出的核酸含量情况如图“含量结果”，P基因的产物长度为158bp,G基因的长度为167bp,C基因的产物长度193bp。P基因和G基因一起扩条带不能分开。但P基因和G基因单独扩增的产物的产量和P基因G基因一起扩增的结果是相近的。这是不是说明P基因和G基因的引物并未发生相互抑制的情况。为了让P基因G基因的产物分开。我是不是应该果断换内参的引物了，让这二者的产物bp数相差大一点。
产物相近，是不是要对内参换引物了。
2013-09-16.JPG


产物相近，是不是要对内参换引物了。-1
含量结果.jpg
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1楼 2013-09-21 12:15:32
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