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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » SDS-PAGE的maker条带不够
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丫头爱泡泡

新虫 (初入文坛)

[求助] SDS-PAGE的maker条带不够

我连跑了两次SDS-PAGE，用的是thermo的 pageruler prestained protein ladder, 结果在70~10KD之间总是少一条带，我的胶是12%的分离胶，求高手指点~~~
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1楼 2013-09-15 13:15:39
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丫头爱泡泡

新虫 (初入文坛)
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2楼: Originally posted by 展望明天 at 2013-09-15 14:53:42
你的跑胶buffer用的对不对啊。。

buffer是1*SDS的电泳缓冲液

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7楼2013-09-17 16:35:33
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丫头爱泡泡

新虫 (初入文坛)
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3楼: Originally posted by 木_塚 at 2013-09-15 21:24:18
marker竟然少条带？真没听说过这种情况，求上marker视图和跑胶图。

我等级太低，上不了图……

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8楼2013-09-17 16:51:27
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丫头爱泡泡

新虫 (初入文坛)
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11楼: Originally posted by songzuowei at 2013-09-18 15:31:06
估计是跑的时间太长了 将最下面的10KD的带跑没了 而不是中间带没了 不然不科学

有没有可能是10和15的没跑开？
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12楼2013-09-19 23:54:38
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丫头爱泡泡

新虫 (初入文坛)
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9楼: Originally posted by jiang701820 at 2013-09-18 12:50:57
少的是哪个条带呀？...

就是70到10只有五条带，说明上有六条，我也不知道少了哪条，哪条最底下的绿色的还在……
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13楼2013-09-19 23:57:26
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丫头爱泡泡

新虫 (初入文坛)
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10楼: Originally posted by ritchiejin at 2013-09-18 14:23:31
你是怎么确定是缺了中间那一条，而不是跑出去一条？

最底下的绿色的条带还在……
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14楼2013-09-19 23:58:53
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丫头爱泡泡

新虫 (初入文坛)
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15楼: Originally posted by ritchiejin at 2013-09-20 07:20:11
你用的是预染的marker?哪个公司的。时间长的话你煮一下再用，是不是降解了。
...

thermo

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17楼2013-09-22 10:45:02
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丫头爱泡泡

新虫 (初入文坛)
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18楼: Originally posted by ritchiejin at 2013-09-23 09:25:15
那你下次跑胶的时候，注意一下marker条带的颜色，看看是不是按照预染颜色逐个展开的。因为没有图，不知道具体什么样子。...

好的，谢谢啦~
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19楼2013-09-23 15:28:00
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丫头爱泡泡

新虫 (初入文坛)
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16楼: Originally posted by jiang701820 at 2013-09-20 11:35:24
你对着说明书上的条带看一下，如果你用的是fermentas的marker的话，特征很明显的，10和17挨的比较近，而且10是绿色的，17和26之间距离远一点，而26,34,43,55四个marker之间的间距基本是一样的，72那条是红色的。...

那有没有可能是17和10压在一起没跑开？
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20楼2013-09-25 21:14:43
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丫头爱泡泡

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
16楼: Originally posted by jiang701820 at 2013-09-20 11:35:24
你对着说明书上的条带看一下，如果你用的是fermentas的marker的话，特征很明显的，10和17挨的比较近，而且10是绿色的，17和26之间距离远一点，而26,34,43,55四个marker之间的间距基本是一样的，72那条是红色的。...

这个是我跑的胶和说明书的对比
SDS-PAGE的maker条带不够
IMG_2095.JPG
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21楼2013-09-25 21:21:57
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