| 查看: 647 | 回复: 1 | |||
will-jiang金虫 (初入文坛)
|
[求助]
PCR引物设计
|
| 求教如何手动设计PCR引物及添加多个酶切位点，并且转入载体中，有什么具体的步骤么？希望各位前辈举例说明，多谢了~~ |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有79人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 关于PCR引物中加入酶切位点的设计方法和酶切问题！ 新手，求帮忙！！
已经有4人回复
- QPCR之引物设计(二)
已经有10人回复
- 等位基因特异性PCR的引物该如何用PRIMER 5.0设计
已经有9人回复
- 关于pcr引物设计的问题
已经有6人回复
- 大家做RT-qPCR设计引物用的什么软件呀？
已经有15人回复
- 通过RT-PCR 获得了一段保守序列 接着如何设计RACE引物
已经有21人回复
- 嵌套PCR引物如何设计？目的片段434bp
已经有6人回复
- PCR引物设计的问题
已经有8人回复
- RT-PCR引物设计
已经有8人回复
- 重叠延伸PCR设计引物
已经有3人回复
- PCR最短可以P多少bp，求大家帮我设计引物！
已经有7人回复
- 做RT-PCR时该用哪段氨基酸序列设计引物
已经有6人回复
- 如何设计重叠延伸PCR引物
已经有14人回复
- 【求助/交流】引物设计信息如此，touchdownPCR如何设计？
已经有7人回复
- 【求助/交流】pCR引物设计的详细规则
已经有7人回复
- 【求助/交流】多重PCR引物设计
已经有14人回复
- 【求助/交流】PCR引物设计出来了，但酶切之后电泳没条带啊
已经有18人回复
- 引物设计求助~
已经有13人回复
yimingwang
金虫 (小有名气)
- 应助: 61 (初中生)
- 金币: 566.5
- 红花: 6
- 帖子: 142
- 在线: 32.9小时
- 虫号: 1192378
- 注册: 2011-01-19
- 性别: GG
- 专业: 植物保护生物技术
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ...
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-09-12 09:56:35
will-jiang: 金币+30, ★★★很有帮助 2013-09-15 08:07:13
will-jiang: 金币+20, ★★★很有帮助 2013-10-05 01:09:03
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-09-12 09:56:35
will-jiang: 金币+30, ★★★很有帮助 2013-09-15 08:07:13
will-jiang: 金币+20, ★★★很有帮助 2013-10-05 01:09:03
|
1.分析目的基因酶切位点，在载体中选择目的基因中没有的单酶切位点。 2.引物：酶切位点序列+1-3个碱基（用来调整阅读框）+21-24个目的基因特异序列。反向引物注意根据要求，是否需要去掉stop code。 3。跑PCR，产物回收，连入TA载体，并测序。 4。T载体内片断酶切回收。 5。目的载体酶切，回收。 6。带酶切位点的目的片断和切好的目的载体，T4连接，转化。 7。科隆PCR鉴定。 结束。 |
2楼2013-09-12 01:17:08
