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银虫 (小有名气)

[交流] 引物设计的原则 已有2人参与

引物设计是最基础的分子实验的必修课。引物设计一般情况下需要遵守以下原则:
1:引物最好在模板CDNA的保守区域设计
2:引物长度一般在15-30个碱基之间
3:引物中的GC含量一般在40%-60%之间,Tm值最好接近72摄氏度
4:引物中3撇段要避开密码子的第三位,最好选择T开头
5:碱基要随机分配,尽量不要出现连续的三个一致。
6:引物自身及引物之间不存在碱基互补配对
7:引物的5撇端和中间的吉布斯自由能值相对较高,而3撇端吉布斯自由能较低
8:引物的5撇端可以修饰了,3撇端不能修饰
9:扩增产物的单链不能形成二级结构
10:引物应具有特异性
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发扬钉子精神
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2楼2013-09-12 08:32:22
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俊锋

新虫 (初入文坛)

谢谢楼主
3楼2016-02-29 10:27:09
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