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引物设计的原则 已有2人参与
引物设计是最基础的分子实验的必修课。引物设计一般情况下需要遵守以下原则：
1：引物最好在模板CDNA的保守区域设计
2：引物长度一般在15-30个碱基之间
3：引物中的GC含量一般在40%-60%之间，Tm值最好接近72摄氏度
4：引物中3撇段要避开密码子的第三位，最好选择T开头
5：碱基要随机分配，尽量不要出现连续的三个一致。
6：引物自身及引物之间不存在碱基互补配对
7：引物的5撇端和中间的吉布斯自由能值相对较高，而3撇端吉布斯自由能较低
8：引物的5撇端可以修饰了，3撇端不能修饰
9：扩增产物的单链不能形成二级结构
10：引物应具有特异性 |
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