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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 需构建pcDNA3.1-GFP载体，后续还需要把目的基因连到pcDNA3.1-GFP载体上
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lyw7664

金虫 (小有名气)

[求助] 需构建pcDNA3.1-GFP载体，后续还需要把目的基因连到pcDNA3.1-GFP载体上

现有pcDNA3.1(+)和pEGFP-C1载体，需把EGFP蛋白连到pcDNA3.1上，构成pcDNA3.1-GFP载体，后续还需要把目的基因连到pcDNA3.1-GFP载体上，请各位虫友给点意见，怎么构建pcDNA3.1-GFP载体，非常感谢！！！
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1楼 2013-09-06 17:58:00
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peakg7

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-09-07 21:29:49
lyw7664: 金币+1, ★有帮助 2013-09-11 18:11:35
先把egfp片段pcr出来，构建到pcDNA3.1里面去就可以了。原理是一样的
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2楼2013-09-07 16:18:17
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世外清风

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
lyw7664: 金币+1, ★有帮助 2013-09-11 18:11:39
你的设计有问题，3.1上连两个基因能保证两个基因都表达吗？建议更换载体骨架直接用peGFP-N1或peGFP-C1。后者上面有IRES元件，能让两个基因在同一个启动子下表达。
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3楼2013-09-08 22:03:48
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