24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2694  |  回复: 3

478203301

金虫 (小有名气)

[求助] pcDNA3.1的ABC有什么区别

pcDNA3.1载体分了ABC三型,在构建时这三种载体有什么区别?目的基因插入pcDNA3.1ABC三型之后有无区别,读框是否错位?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
478203301: 金币+5, 有帮助 2013-01-10 17:06:00
很多表达载体都分了ABC,特别是N端带tag的载体,主要区别在MCS各有一个碱基的错位,如果你手上ABC三种载体都有的话,你设计基因上游引物的时候,你不用考虑对读码框的问题,因为3种质粒当中肯定会有一个适合,然后就选适合的那个载体来构建载体,如果你只有3个当中的一个,那就要根据你有的那个载体来设计引物,同时考虑基因融合和对读码框的问题
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2013-01-10 14:21:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

478203301

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-01-10 14:21:56
很多表达载体都分了ABC,特别是N端带tag的载体,主要区别在MCS各有一个碱基的错位,如果你手上ABC三种载体都有的话,你设计基因上游引物的时候,你不用考虑对读码框的问题,因为3种质粒当中肯定会有一个适合,然后就 ...

谢谢你的答复,我还有一个疑问,怎么确定哪个是适合的呢?读码框就是从我们插入序列的ATG开始的,那还怎么考虑对读码框的影响呢?
3楼2013-01-10 18:00:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

引用回帖:
3楼: Originally posted by 478203301 at 2013-01-10 18:00:00
谢谢你的答复,我还有一个疑问,怎么确定哪个是适合的呢?读码框就是从我们插入序列的ATG开始的,那还怎么考虑对读码框的影响呢?...

印象中pcDNA3.1载体是没有ABC之分,倒有+ 或者 - 载体,

pcDNA3.1 N端好像不带tag,所以就无所谓考虑读码框的问题了,考虑读码框的问题是你在构建带N端或者C端tag的时候需要考虑,但有N端tag的时候,翻译是从Tag的那个ATG开始的,然后才是你的基因,因此tag到你基因ATG之间的序列要是3的倍数,否知翻译会发生移码
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
4楼2013-01-10 22:07:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 478203301 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 288求调剂 +12 没有答案_ 2026-04-05 12/600 2026-04-08 00:17 by T可可西里T
[考研] 316求调剂 +4 15318418673 2026-04-07 4/200 2026-04-07 22:12 by hemengdong
[考研] 材料专硕(0856) 339分求调剂 +14 哈哈哈鹅哈哈哈 2026-04-05 14/700 2026-04-07 22:02 by lijunpoly
[考研] 277求调剂 数一104分 +9 瓶子PZ 2026-04-05 14/700 2026-04-07 17:52 by 蓝云思雨
[考研] 生物与医药求调剂 +7 heguanhua 2026-04-05 8/400 2026-04-06 18:41 by macy2011
[考研] 一志愿南昌大学,085600,344分求调剂 +9 调剂上岸玘 2026-04-05 10/500 2026-04-06 09:30 by dongzh2009
[考研] 材料专硕283求调剂 +17 试试看呗 2026-04-04 18/900 2026-04-06 09:24 by 286640313
[考研] 348求调剂 +6 wukira 2026-04-04 6/300 2026-04-05 18:11 by 猪会飞
[考研] 278求调剂 +14 范婷娜 2026-04-04 15/750 2026-04-04 22:15 by lqwchd
[考研] 333求调剂 +12 wfh030413@ 2026-04-03 13/650 2026-04-04 21:02 by jj987
[考研] 283求调剂 +4 mcbbc 2026-04-03 5/250 2026-04-04 20:51 by imissbao
[考研] 272求调剂 +4 松柏常青5 2026-04-03 4/200 2026-04-04 17:03 by babysonlkd
[考研] 一志愿东北大学085901土木专硕345求调剂 +3 zxt11111 2026-04-04 3/150 2026-04-04 14:21 by 土木硕士招生
[考研] 考研调剂 +5 小sun要好运 2026-04-03 5/250 2026-04-03 21:43 by 啵啵啵0119
[考研] 调剂 +5 asdasdassda 2026-04-03 6/300 2026-04-03 20:27 by 岸上的一条鱼
[考研] 303求调剂 +3 一色清羽 2026-04-02 4/200 2026-04-03 10:22 by 蓝云思雨
[考研] 309求调剂 +14 呆菇不是戴夫 2026-04-02 14/700 2026-04-03 09:42 by 蓝云思雨
[考研] 求调剂 302分初试 0854 +5 伶可乐 2026-04-02 5/250 2026-04-02 17:53 by 笔落锦州
[考研] 266求调剂 +4 学员97LZgn 2026-04-02 4/200 2026-04-02 13:03 by yulian1987
[考研] 一志愿北交大材料工程,总分358 +4 cs0106 2026-04-01 4/200 2026-04-02 07:42 by 尚水阁主
信息提示
请填处理意见