24小时热门版块排行榜    

查看: 1244  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

下雨了吗__

铁杆木虫 (小有名气)

[求助] 肠杆菌表达蛋白出问题

我将质粒转入肠杆菌表达菌株,涂板,挑取了单菌落做菌保,表达蛋白,开始表达的很好,后来隔了一段时间(一个月左右)拿菌保出来做表达,无论是摇瓶还是上罐表达量都特别低,很费解。求高手指导
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小亚杰

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼上说的对,蛋白表达的菌株在-80℃放着也会退化,如果你隔了一段时间仍要大规模表达,最好把载体重新转一下表达菌株Bl21。
3楼2013-08-20 17:17:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

风影一生

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+2, 感谢发帖应助,帮助虫子 2013-08-20 18:05:57
这个是正常的,随着传代的增多质粒会慢慢丢失,菌种本身也会退化,哪怕是保藏的高表达菌株过段时间再用也会发生表达量降低。
需要你不停的活化挑单菌落筛选,类似于自然选育的工作,纯粹是体力活。
2楼2013-08-20 15:58:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

下雨了吗__

铁杆木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 小小亚杰 at 2013-08-20 17:17:25
楼上说的对,蛋白表达的菌株在-80℃放着也会退化,如果你隔了一段时间仍要大规模表达,最好把载体重新转一下表达菌株Bl21。

我应该重新做转化呢还是将已有菌保重新涂板
4楼2013-08-21 07:54:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小亚杰

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
下雨了吗__: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-08-21 20:38:30
引用回帖:
4楼: Originally posted by 下雨了吗__ at 2013-08-21 07:54:24
我应该重新做转化呢还是将已有菌保重新涂板...

重新转化。我试过把已有菌种重新涂板没有明显效果。
5楼2013-08-21 12:17:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 287求调剂 +8 晨昏线与星海 2026-03-19 9/450 2026-03-22 17:01 by i_cooler
[考研] 一志愿中南化学(0703)总分337求调剂 +9 niko- 2026-03-19 10/500 2026-03-22 16:08 by ColorlessPI
[考研] 298求调剂一志愿211 +3 上岸6666@ 2026-03-20 3/150 2026-03-22 15:50 by ColorlessPI
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:09 by 星空星月
[考研] 化学调剂 +5 yzysaa 2026-03-21 5/250 2026-03-21 22:12 by peike
[考研] 一志愿深大,0703化学,总分302,求调剂 +4 七月-七七 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:20 by 学员8dgXkO
[基金申请] 学校已经提交到NSFC,还能修改吗? 40+4 babangida 2026-03-19 9/450 2026-03-21 16:12 by babangida
[考研] 279求调剂 +5 红衣隐官 2026-03-21 5/250 2026-03-21 14:59 by lature00
[考研] 085700资源与环境308求调剂 +12 墨墨漠 2026-03-18 13/650 2026-03-21 01:42 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武理材料305分求调剂 +6 想上岸的鲤鱼 2026-03-18 7/350 2026-03-21 01:03 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华南师大 070300(化学)304分求调剂 +3 0703武芊慧雪304 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:48 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-18 6/300 2026-03-21 00:32 by JourneyLucky
[考研] 295求调剂 +4 一志愿京区211 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:41 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武汉理工材料工程专硕调剂 +9 Doleres 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:36 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +4 晨昏线与星海 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:15 by JourneyLucky
[考研] 中南大学化学学硕337求调剂 +3 niko- 2026-03-19 6/300 2026-03-20 21:58 by luoyongfeng
[考研] 261求B区调剂,科研经历丰富 +3 牛奶很忙 2026-03-20 4/200 2026-03-20 19:34 by JourneyLucky
[考研] 一志愿中国海洋大学,生物学,301分,求调剂 +5 1孙悟空 2026-03-17 6/300 2026-03-19 23:46 by zcl123
[考研] 308求调剂 +4 是Lupa啊 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:12 by ruiyingmiao
[考研] 085601求调剂 +4 Du.11 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:08 by ruiyingmiao
信息提示
请填处理意见