| 查看: 871 | 回复: 2 | ||||
fuyuandj86版主 (著名写手)
己所不欲，勿施于人
|
[求助]
PCR引物设计Tm
|
| 请问PCR引物温度如果高于extension temperature(就是72度那一步)会不会有很大影响? 我的引物GC含量太高了,但是序列又不能随便改,要么引物会很短,要么Tm高于72度,不知道会不会有影响. |
回复此楼» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有92人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有8人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 关于PCR引物中加入酶切位点的设计方法和酶切问题！ 新手，求帮忙！！
已经有4人回复
- PCR引物设计求助
已经有6人回复
- 大家做RT-qPCR设计引物用的什么软件呀？
已经有15人回复
- PCR引物TM值的确定
已经有13人回复
- 通过RT-PCR 获得了一段保守序列 接着如何设计RACE引物
已经有21人回复
- PCR引物的量如何确定，求助高手指教
已经有11人回复
- realtimePCR引物
已经有11人回复
- 关于PCR退火温度
已经有17人回复
- 重叠延伸PCR设计引物
已经有3人回复
- 1.5kb的 PCR目的序列GC含量高达67%，引物Tm值达90℃，怎么P比较好？
已经有16人回复
- 设计引物时酶切位点保护碱基的问题
已经有8人回复
- 做RT-PCR时该用哪段氨基酸序列设计引物
已经有6人回复
- 【求助/交流】引物Tm值很高，PCR求助
已经有17人回复
- 【求助/交流】引物设计信息如此，touchdownPCR如何设计？
已经有7人回复
- 【求助/交流】引物的PCR Tm值 请教
已经有7人回复
- 【求助/交流】pCR引物设计的详细规则
已经有7人回复
- 【求助/交流】低GC含量的模板设计引物
已经有7人回复
15879003030
铜虫 (小有名气)
- 应助: 18 (小学生)
- 金币: 57.2
- 散金: 20
- 红花: 1
- 帖子: 96
- 在线: 33.7小时
- 虫号: 2594622
- 注册: 2013-08-13
- 专业: 生物化学
2楼2013-08-16 10:44:17
凌波丽
专家顾问 (知名作家)
-
专家经验: +218 - MolEPI: 44
- 应助: 397 (硕士)
- 贵宾: 0.044
- 金币: 2118.9
- 散金: 10
- 红花: 208
- 帖子: 5633
- 在线: 571.6小时
- 虫号: 1766465
- 注册: 2012-04-19
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
- 管辖: 生物科学综合
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
fuyuandj86: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2013-08-16 22:05:25
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-08-16 22:08:47
感谢参与，应助指数 +1
fuyuandj86: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2013-08-16 22:05:25
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-08-16 22:08:47
|
引物GC含量太高，TM高一点PCR一般 没有问题，TM高与72度也可以，extension temperature这步主要是考虑Taq聚合酶的承受能力和酶活力，温度高些高与72度，Taq效率不是最高，稳定性可能也不是最为稳定，不过Taq能耐94度，应该问题不大。 引物GC含量太高适当地提高变性温度，一般是90-92度，楼主可以提高94度。 |
3楼2013-08-16 11:50:11
