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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 高人来看看提取的RNA能做RT等后续试验吗？
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yuminzorro

木虫 (小有名气)

[求助] 高人来看看提取的RNA能做RT等后续试验吗？

第一次提取RNA，用天根试剂盒提的，电泳加样5微升，120V，跑了25min。电泳槽是RNA专用的，TAE实验室好像用的是跑DNA用的。从点样空出来就降解了吗？不知道RNA能做RT等后续试验吗？
高人来看看提取的RNA能做RT等后续试验吗？
2013-08-10 M+多+少细胞RNA 提取.jpg
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1楼 2013-08-11 10:00:41
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

real-time

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yuminzorro: 金币+2 2013-08-12 15:53:32
引用回帖:
3楼: Originally posted by 2008101111 at 2013-08-11 10:52:23
做普通的试验可以用，但如果是要做荧光定量或者其他高水平试验就需要改进一下

我的意见刚好相反哦
要是做荧光定量PCR可以用，因为扩增片段短些，即使有部分降解也可以，要是克隆长片度的基因要求提取的RNA比较完整，否则很难克隆得到目的序列！
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一步法逆转录RNA多重实时荧光定量PCR课题服务QQ461749807
8楼2013-08-12 08:54:02
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grape_vine

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
yuminzorro: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-08-12 15:53:45
我觉得这里面有残留的DNA,而且量还比较大,建议用DNase处理后,氯仿抽屉,乙醇沉淀后再用来做反转录!
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9楼2013-08-12 09:03:34
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lpzl

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
只要看到有3条带就可以了。。。
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Start_everyday_with_a_new_hope,_leave_bad_memories...
2楼2013-08-11 10:43:53
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2008101111

金虫 (正式写手)

学术江湖混子

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yuminzorro: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-08-11 13:32:35
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-08-11 20:50:09
做普通的试验可以用，但如果是要做荧光定量或者其他高水平试验就需要改进一下
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自主创业者，捣腾生物试剂
3楼2013-08-11 10:52:23
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Sthunder

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
yuminzorro: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-08-11 13:32:42
虽然只有2条带，但做RT还是没问题的！Good luck！
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互助互励，共奋共进！！
4楼2013-08-11 11:01:22
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yinchu1990

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
28:18差不多2:1 还可以啊
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5楼2013-08-11 19:40:11
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yuhanjie0205

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
yuminzorro: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-08-12 15:52:48
估计是用纯化柱提取RNA，5S条带被过滤掉了，但28S和18S条带很清晰，而且亮度比也比较理想，做一般的RT应该没什么问题。
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6楼2013-08-11 23:16:01
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普通回帖

longrna

新虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by yuhanjie0205 at 2013-08-11 23:16:01
估计是用纯化柱提取RNA，5S条带被过滤掉了，但28S和18S条带很清晰，而且亮度比也比较理想，做一般的RT应该没什么问题。

同意。
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伟大航线....
7楼2013-08-12 08:39:41
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yuminzorro

木虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by real-time at 2013-08-12 08:54:02
我的意见刚好相反哦
要是做荧光定量PCR可以用，因为扩增片段短些，即使有部分降解也可以，要是克隆长片度的基因要求提取的RNA比较完整，否则很难克隆得到目的序列！...

后面就是做荧光定量。。谢谢！
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10楼2013-08-12 15:53:28
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