| 查看: 5149 | 回复: 3 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
PCR引物退火温度怎么计算？
|
||
|
最近做PCR设计了一对引物，引物序列为： F:CGTGCCTCCTATCCACGATTCCG R:ATTTTGCGTAATTGGGTTTGATT 引物序列和模版完全配对的，可是实验的时候成功率很低，每次都只能扩增出来不多几个样本，引物合成报告单上正向引物的Tm值65.5度，反向引物53度，是不是因为两条引物的Tm值相差太大啊？已经尝试了好几个温度了还是扩增效率很低？ 求高手帮忙分析哪里出问题了，需要重新设计引物吗，有个同学说可以给反向引物的5'端增加几个碱基提高一下退火温度，这样做可以吗？每条引物的退火温度怎样单独计算啊？ |
回复此楼» 猜你喜欢
三氯氧磷跟酚
已经有1人回复
-
关于举办2024年化工制药与材料类优秀大学生暑期夏令营的通知
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有182人回复
-
M9培养基浑浊
已经有1人回复
-
面上评审意见-帮忙看一下等级（没上会）
已经有80人回复
-
目的基因序列中有多个引物插入
已经有1人回复
-
链霉亲和素磁珠偶联biotin修饰分子好还是点击反应偶联分子好？
已经有0人回复
-
磁珠法纯化蛋白相比层析柱有什么优势？
已经有3人回复
-
磁固相萃取在药物分析中有潜在应用价值吗？
已经有0人回复
-
关于为什么要在生物传感形成图案的原因求助
已经有0人回复
-
华东理工大学化工学院胡静课题组招博士生和博士后。欢迎有志科研青年加入！
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- PCR时退火温度比tm值高，可以吗？
已经有35人回复
- 怎么确定变性和退火温度
已经有5人回复
- 通过梯度PCR摸索的最佳退火温度，扩出来的条带不太亮，帮忙分析那些引物不可以用
已经有5人回复
- 在引物上添加酶切位点的先后顺序
已经有3人回复
- SSR引物退火温度如何确定，求助！
已经有9人回复
- PCR中退火温度的选择
已经有11人回复
- 有关引物设计时加酶切位点
已经有8人回复
- 兼并引物的退火温度
已经有5人回复
- 引物加保护碱基
已经有7人回复
- 想向大家请教一下银的退火温度
已经有7人回复
- 上下游引物退火温度相差16℃， 是不是不能p出来啊
已经有6人回复
- 上下游引物退火温度相差16℃，
已经有4人回复
- 关于PCR退火温度
已经有17人回复
- 计算引物退火温度时末端加的酶切位点计算在内吗？
已经有5人回复
- 退火温度和再结晶温度有关系吗
已经有12人回复
- 退火时间的长短对PCR会有什么影响
已经有11人回复
- 【求助】pcr引物退火温度
已经有9人回复
- 【求助/交流】计算PCR引物设计的Tm值，算不算附加的酶切序列和保护序列
已经有16人回复
- 【求助/交流】PCR引物加入酶切位点，Tm值是68.5度，退火温度是不是高些了 ？
已经有14人回复
- 【求助/交流】做realtime-PCR，退火温度很重要吗？
已经有15人回复
- 【求助/交流】这退火温度怎么算啊
已经有8人回复
- 【求助/交流】pCR引物设计的详细规则
已经有7人回复
- 【求助】PCR退火温度及时间如何确定
已经有10人回复
- 【求助】合金的均匀化退火温度如何选取？
已经有11人回复
- 【求助/交流】引物长的话退火温度应该升高还是降低？
已经有6人回复
- 【求助】18-8型奥氏体不锈钢冷轧后再结晶退火温度
已经有9人回复
3楼2013-08-11 08:40:26
yimingwang
金虫 (小有名气)
- 应助: 61 (初中生)
- 金币: 566.5
- 红花: 6
- 帖子: 142
- 在线: 32.9小时
- 虫号: 1192378
- 注册: 2011-01-19
- 性别: GG
- 专业: 植物保护生物技术
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-08-10 14:20:13
小虎6487: 金币+5, ★有帮助 2013-08-11 09:05:23
小虎6487: 金币+10, ★有帮助 2013-08-12 18:17:21
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-08-10 14:20:13
小虎6487: 金币+5, ★有帮助 2013-08-11 09:05:23
小虎6487: 金币+10, ★有帮助 2013-08-12 18:17:21
|
Primer Tm Calculator在线使用。 http://www6.appliedbiosystems.com/support/techtools/calc/ |
2楼2013-08-10 00:13:26
amareyue
金虫 (小有名气)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 410.8
- 散金: 50
- 帖子: 295
- 在线: 51.3小时
- 虫号: 2589063
- 注册: 2013-08-09
- 性别: GG
- 专业: 生物技术药物
4楼2013-08-11 16:30:15
20