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Taqman 荧光定量PCR特异性问题
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wangweijian
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[交流]
Taqman 荧光定量PCR特异性问题
在做了几次Taqman探针的实验后,摸索了不同温度下的荧光扩增曲线,目前来看退火温度低的条件下扩增曲线更好,更接近S型。但是又怕退火温度过低会导致特异性降低,请问有办法检测taqman荧光定量PCR是否是非特异性扩增吗?
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2013-08-05 15:35:38
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at 2013-08-05 16:44:22
从设计角度去考虑和实际上和你目的片段较为接近的种属进行PCR,看是否有非特异性,还有就是多做几个NTC看是否有扩增
谢谢,我的意思是除了电泳看有没有杂带判断特异性外,是否还可以从图像上看?软件分析里面可以看吗?
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2013-08-06 10:49:05
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从设计角度去考虑和实际上和你目的片段较为接近的种属进行PCR,看是否有非特异性,还有就是多做几个NTC看是否有扩增
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2楼
2013-08-05 16:44:22
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2013-08-06 11:16:41
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3楼
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Originally posted by
wangweijian
at 2013-08-06 10:49:05
谢谢,我的意思是除了电泳看有没有杂带判断特异性外,是否还可以从图像上看?软件分析里面可以看吗?...
我知道设计角度就是指NCBI BLAST算不算你所说的软件分析力?
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4楼
2013-08-06 10:58:32
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