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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » Taqman 荧光定量PCR特异性问题
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wangweijian

金虫 (小有名气)

[交流] Taqman 荧光定量PCR特异性问题

在做了几次Taqman探针的实验后，摸索了不同温度下的荧光扩增曲线，目前来看退火温度低的条件下扩增曲线更好，更接近S型。但是又怕退火温度过低会导致特异性降低，请问有办法检测taqman荧光定量PCR是否是非特异性扩增吗？
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1楼 2013-08-05 15:35:38
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love_st

金虫 (著名写手)
★
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从设计角度去考虑和实际上和你目的片段较为接近的种属进行PCR，看是否有非特异性，还有就是多做几个NTC看是否有扩增
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2楼2013-08-05 16:44:22
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wangweijian

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by love_st at 2013-08-05 16:44:22
从设计角度去考虑和实际上和你目的片段较为接近的种属进行PCR，看是否有非特异性，还有就是多做几个NTC看是否有扩增

谢谢，我的意思是除了电泳看有没有杂带判断特异性外，是否还可以从图像上看？软件分析里面可以看吗？
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3楼2013-08-06 10:49:05
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love_st

金虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★
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wangweijian: 金币+4 2013-08-06 11:16:41
引用回帖:
3楼: Originally posted by wangweijian at 2013-08-06 10:49:05
谢谢，我的意思是除了电泳看有没有杂带判断特异性外，是否还可以从图像上看？软件分析里面可以看吗？...

我知道设计角度就是指NCBI BLAST算不算你所说的软件分析力？
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4楼2013-08-06 10:58:32
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