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从结果上看,接近60度了,还有很多杂带,而且很亮。给两个建议,一、减少循环数,25-28之间选择,二、我觉得引物设计的问题要大些,重新设计,引物长度长些,专一性会好些!
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应该不难设计引物,你该从基础做起 的
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你设计的引物退火温度是多少,还可以再提高些吗?我的经常60多度,另外用降落pcr试试
[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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提高退火温度或者降低模板浓度试试看
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