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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 引物退火温度
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jue9958

新虫 (小有名气)

[求助] 引物退火温度

内参引物为58度，特异性引物为60度，实在是不能做温度梯度，求告知该如何选择温度？
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1楼 2013-08-04 10:04:45
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
jue9958(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-08-04 15:42:18
这个退火温度要求没那么严格，试一下不就知道了
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jiayoubashaonian
3楼2013-08-04 15:20:48
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duoyidian

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
看哪个引物做pcr反应的速度慢，这个很多书上都有啊
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2楼2013-08-04 10:54:59
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宋虫虫

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-08-04 15:42:29
同样的样本、试剂，只要把仪器的退火温度改一下，多试几个温度，不就知道哪个温度最适合了吗？
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让自己变得更强
4楼2013-08-04 15:41:37
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-08-06 09:43:21
看你要做什么实验了。如果只是需要同时P出两个片段，直接用退火温度低的那个温度。如果是要做定量，需要优化到两个反应的扩增效率和特异性最好的温度。
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5楼2013-08-05 00:42:28
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