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分子量13KDa的蛋白的转膜条件？ 已有2人参与
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最近在做一个分子量13KDa的小分子蛋白，每次都在转膜的一步出问题（胶是12%的、样品做其他的蛋白也做出来了）。跑完胶后MARKER还完整漂亮的在胶上，转膜完后就只能见到前面的大分子的MARKER了。小分子10KDa的MARKER就不见了，然后立春红染色膜上15KDa以下的蛋白条带都看不见。考染胶上15KDa以下的蛋白条带也看不见了。转膜的条件试过如下几种都失败了：1、350mA 1h；2、200mA 1h；3、200mA 45min；4、75mA 70min;5、350mA 45min;以上的转膜条件有参考其他老师做小分子条件的，有在此基础上修改了一下的，也有参考文献的，都失败了。同样都是10KDa marker转不上，染色后蛋白也看不见。因为担心立春红敏感度不够好，我也做到用ECL扫膜，但是最后也是没有条带的。请大家帮忙想想办法吧，谢谢了！ |
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