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提取细菌基因组DNA时总是会有蛋白残留
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植语
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专业: 微生物生理与生物化学
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提取细菌基因组DNA时总是会有蛋白残留
提取细菌基因组DNA时总是会有蛋白残留,电泳时,用不同浓度的胶跑出来的效果差距也很远,左边是0.6%的胶右边是1.0%的胶,,加样孔下方一点点的亮条带是不是蛋白残留的结果啊?
DSC00591.JPG
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【求助/交流】细菌基因组DNA的提取法(CTAB/NaCl 法),提取的DNA是否为细菌总DNA? 非�
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1楼
2013-07-17 16:25:31
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maidi12
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6楼
2013-07-18 08:39:23
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huanghznd
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2013-07-17 16:37:10
是的。细菌基因组DNA时有蛋白残留时,跑胶有拖带的现象,胶浓度低,孔径大,拖得更明显。点样孔下的残留的就是蛋白。可以用酚氯仿重新抽提,可以去除一此蛋白。
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2楼
2013-07-17 16:32:58
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专业: 微生物生理与生物化学
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2楼
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Originally posted by
huanghznd
at 2013-07-17 16:32:58
是的。细菌基因组DNA时有蛋白残留时,跑胶有拖带的现象,胶浓度低,孔径大,拖得更明显。点样孔下的残留的就是蛋白。可以用酚氯仿重新抽提,可以去除一此蛋白。
之前纯化过,还是会有,后来换了新的酚氯仿,好了一些,,但做PCR还是得不到目标条带,,,不知道多糖残留会不会也是像图中那样,加样孔下面一点点有亮带,,还有,提的DNA用水溶解有时会很粘稠,不知道是残留了什么? 也很想知道我是用CTAB法提的DNA,不知道SDS和CTAB是在哪步被去除的,,是用异丙醇沉淀的时候溶解在了异丙醇里吗?说是CTAB易溶于异丙醇
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3楼
2013-07-17 22:17:57
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fuyuandj86
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看看OD260/OD280的比例对不对,就能确定蛋白残留量有多少
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
4楼
2013-07-18 00:37:38
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