应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 荧光定量引物疑问
71/1返回列表
查看: 965  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

617004340

金虫 (小有名气)

[求助] 荧光定量引物疑问

新手准备做荧光定量PCR呢，大家看看这对引物咋样啊，有啥问题没有啊，小弟不是很懂的，希望大家指导、拍砖。还有一问题就是这个错配是啥情况啊？求解
荧光定量引物疑问
Screenshot20130704210939.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-07-04 21:12:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

武穆大成

木虫 (著名写手)

笨蛋

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物版块 期待你的精彩和更详细的解答。 2013-07-04 22:24:17
617004340: 金币+2, ★有帮助 2013-07-05 12:44:06
哥们，这引物就别用了。。。ΔG越小说明结合越稳定。。最好别出现小于-5的。。你这引物明显都是引物错配，。，换吧。。选择分数高
赞一下 回复此楼
2楼2013-07-04 21:37:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

武穆大成

木虫 (著名写手)

笨蛋

【答案】应助回帖

★
617004340: 金币+1, ★有帮助 2013-07-06 15:39:07
错配就是在模板或者引物上，在你设计引物的位置之外，还有某个地方，引物结合上去的可能性也很大。。
赞一下 回复此楼
3楼2013-07-04 21:39:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

617004340

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 武穆大成 at 2013-07-04 21:37:33
哥们，这引物就别用了。。。ΔG越小说明结合越稳定。。最好别出现小于-5的。。你这引物明显都是引物错配，。，换吧。。选择分数高

这个就是最好的啊，其他的都有发卡结构和二聚体的，我都不知道该咋整了
赞一下 回复此楼
4楼2013-07-05 09:33:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

love_st

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
617004340: 金币+1, ★有帮助 2013-07-05 12:44:42
可以尝试下，虽然二聚体G值较高，但是也是在中间，可能也不会有产物，顶多就是引物用多点而已
赞一下 回复此楼
5楼2013-07-05 09:35:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

0700901104

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-07-05 09:48:42
617004340: 金币+1 2013-07-05 12:44:50
错配较多，GC含量差距有点大，Tm值差将近5度 如果没有别的引物可以选择也可以试试 如果上荧光熔解曲线没有双峰也可以用的。荧光的时候的温度要比合成引物单上的Tm值大2-3度。
赞一下 回复此楼
别爱的太迟，别忽略了亲情，别什么都没了才后悔！
6楼2013-07-05 09:39:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yzz597187

新虫 (初入文坛)
你这个3，的错配不多，应该勉强可以，你可以先合成来试一下
赞一下 回复此楼
7楼2013-07-20 18:52:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 617004340 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 5/250 2026-11-13 11:37 by Equinoxhua
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 gRND4NVAZ8VG 2026-11-11 5/250 2026-11-13 11:15 by Equinoxhua
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +8 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 9/450 2026-11-13 11:11 by Equinoxhua
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +6 FChKX8meu1ds 2026-11-09 10/500 2026-11-13 11:08 by Equinoxhua
[考博] 27博士申请（市政/环境） +3 ladf 2026-11-12 3/150 2026-11-13 08:19 by Equinoxhua
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 4/200 2026-11-12 12:51 by ECLTXnJnRSXf
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 4/200 2026-11-12 12:48 by ECLTXnJnRSXf
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 cdqGD6ftHmbl 2026-11-11 5/250 2026-11-12 12:28 by ECLTXnJnRSXf
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 4/200 2026-11-12 12:28 by ECLTXnJnRSXf
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-11 5/250 2026-11-12 11:44 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 9/450 2026-11-12 11:22 by HajghKOMynmz
[基金申请] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 czAiolzR0IJC 2026-11-10 9/450 2026-11-12 11:11 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +7 czAiolzR0IJC 2026-11-10 9/450 2026-11-12 11:00 by HajghKOMynmz
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 czAiolzR0IJC 2026-11-10 8/400 2026-11-12 10:49 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 7/350 2026-11-12 10:16 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 YHiw1gou1Eda 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:14 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 3/150 2026-11-12 08:26 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 FChKX8meu1ds 2026-11-09 9/450 2026-11-12 05:19 by 9fOTqj074tIg
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 8/400 2026-11-12 04:57 by 9fOTqj074tIg
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +6 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 9/450 2026-11-12 04:57 by 9fOTqj074tIg
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭