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617004340

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[求助] 荧光定量引物疑问

新手准备做荧光定量PCR呢，大家看看这对引物咋样啊，有啥问题没有啊，小弟不是很懂的，希望大家指导、拍砖。还有一问题就是这个错配是啥情况啊？求解

荧光定量引物疑问

Screenshot20130704210939.jpg

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1楼 2013-07-04 21:12:41

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yzz597187

新虫 (初入文坛)

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你这个3，的错配不多，应该勉强可以，你可以先合成来试一下

7楼2013-07-20 18:52:56

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武穆大成

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【答案】应助回帖

★ ★ ★
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物版块期待你的精彩和更详细的解答。 2013-07-04 22:24:17
617004340: 金币+2, ★有帮助 2013-07-05 12:44:06

哥们，这引物就别用了。。。ΔG越小说明结合越稳定。。最好别出现小于-5的。。你这引物明显都是引物错配，。，换吧。。选择分数高

2楼2013-07-04 21:37:33

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【答案】应助回帖

★
617004340: 金币+1, ★有帮助 2013-07-06 15:39:07

错配就是在模板或者引物上，在你设计引物的位置之外，还有某个地方，引物结合上去的可能性也很大。。

3楼2013-07-04 21:39:10

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引用回帖:

2楼: Originally posted by 武穆大成 at 2013-07-04 21:37:33
哥们，这引物就别用了。。。ΔG越小说明结合越稳定。。最好别出现小于-5的。。你这引物明显都是引物错配，。，换吧。。选择分数高

这个就是最好的啊，其他的都有发卡结构和二聚体的，我都不知道该咋整了

4楼2013-07-05 09:33:10

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