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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药代动力学 » 药代动力学中提取回收率低的问题
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黄小妹儿

铜虫 (小有名气)

[求助] 药代动力学中提取回收率低的问题 已有2人参与

请教各位大侠，我做一个中药两个成分的药代动力学，
方法为2倍量甲醇直接沉淀蛋白，上清液吹干，复溶。
回收率做法：吸相应高中低浓度的标准品溶液吹干，加200ul空白血浆，在按血浆处理办法处理，记录峰面积A1。洗相应高中低标准品溶液吹干，定容至相应浓度，记录峰面积A2。所得回收率=A1/A2，值在70%~76%之间，文献报道为90%以上。而且质控样品每个浓度平行的五份中每份的峰面积有所差异，标准曲线做出来也很丑，不能达到要求。
我想请教各位在做质控样品时，取相应标准品溶液吹干后，是直接加空白血浆混匀呢，还是先加甲醇混匀后在加空白血浆好（我所测两成分不溶于水）。这种回收率是不是证明方法有问题啊，还是操作不当。跪求各位大侠指导。谢谢
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1楼 2013-06-29 10:57:54
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Matt Luo

新虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 陈贝贝 at 2018-05-31 08:21:22
请问下蛋白沉淀剂的体积算到稀释标品吗？谢谢...

不算，和样品同法处理

发自小木虫Android客户端
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9楼2018-06-01 07:53:27
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airhblue11

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
直接用甲醇沉淀的方法，70~76%我觉得已经是可接受的范围了，个人觉得在能测到的前提下，提取回收率达不到90%也无所谓，只要低中高浓度下它的回收率比较平稳就可以。
如果觉得回收率低，可以考虑用其他方法，如极性比较小的话考虑用乙酸乙酯萃取，也可以加入少量甲醇后用乙酸乙酯萃取，也可以用其他二元试剂。如果化合物热或光不稳定，那就要低温、避光处理或甲醇一步沉淀法，也可以考虑加入一些酸进行保护。
还有提取回收率做法与我常用的方法有区别：我是往空白血浆中加入不同浓度标准品溶液，然后按样品处理;另一份是空白血浆吹干后加相应标准品溶液复溶。
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2楼2013-06-30 10:32:11
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黄小妹儿

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by airhblue11 at 2013-06-30 10:32:11
直接用甲醇沉淀的方法，70~76%我觉得已经是可接受的范围了，个人觉得在能测到的前提下，提取回收率达不到90%也无所谓，只要低中高浓度下它的回收率比较平稳就可以。
如果觉得回收率低，可以考虑用其他方法，如极性 ...

谢谢。我们老师给的建议是把对照品吹干在加
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3楼2013-07-03 19:51:09
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kkbyb

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

标准液加几毫升啊？还费事吹干。直接加不同浓度同体积几微升不吹干就好
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4楼2013-07-03 22:01:38
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