| 查看: 3571 | 回复: 9 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
糖泡泡金虫 (正式写手)
|
[求助]
western blot中古怪的非特异性条带
|
|
|
最近做western blot总受一些非特异性条带的干扰，虽查了好多资料，一一排查，还是没有解决。想问下我的蛋白经过反应后是溶解在酸性溶液里（pH 4.0-6.0）,直接加入loading buffer煮沸后电泳转膜显色，酸性溶液中的蛋白直接western blot会是非特异性显色的来源吗？大家还有什么好的建议针对我的非特异性。 Ps，发现从背面看我的特异性条带特别明显，非特异性条带不怎么清楚。但正面看膜的话特异性条带模糊，非特异性条带特别浓，这又是什么原因？ Help!  [ Last edited by 1949stone on 2013-7-5 at 15:59 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
科研人必读：新一代 KRAS G12C 抑制剂 Olomorasib 的研究进展
已经有0人回复
-
BT-11（Omilancor）研究化合物全解析：从分子结构到实验应用要点
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有262人回复
-
富马酸贝达喹啉：二芳基喹啉类工具化合物的化学特征
已经有0人回复
-
BT投稿with editor状态快两周了，正常吗
已经有25人回复
-
Silevertinib（BDTX-1535）结构拆解：炔基双环片段为何成为合成瓶颈
已经有0人回复
-
RO4929097 解析：双苯并氮杂䓬骨架与 Notch 通路实验设计要点
已经有0人回复
-
分子量 1157 的 PROTAC 怎么配不析出：SGK3-PROTAC1 的溶解、分装与图谱复核
已经有0人回复
-
logP 6.1 的羧酸怎么配母液：GSK 650394 的溶解窗口与稀释顺序
已经有0人回复
-
从"水不溶"到 71 mg/mL：雷特格韦的 pH 依赖溶解与螯合色谱边界
已经有0人回复
-
133 Ų 的极性表面积，如何决定 TNG462 的母液配制与色谱条件
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- Western Blot中蛋白条带信号强弱与上样体积不成正比的可能原因？
已经有3人回复
- westernblot 目标蛋白无条带
已经有9人回复
- Western Blot结果 条带中间 不见了，请教高手！
已经有13人回复
- western blot 条带
已经有15人回复
- 求助 western blot 分离胶处残留条带
已经有8人回复
- Western Blot非特异性条带
已经有3人回复
- western blot 显色6组里边只有一组有条带，急，求助！谢谢！
已经有4人回复
- 14kd的蛋白，做westernblot，电转条件是怎样的
已经有11人回复
- western blot 转膜后只看到marker条带，看不到样本，是怎么回事？
已经有4人回复
- western blot 第一次曝光有条带，而且浓厚，第二次就没有了。。。
已经有13人回复
- western blot 背景深浅问题，请大家指教下啊
已经有6人回复
- 原核表达 pET32a和pET30a Western blot问题
已经有9人回复
- Western Blot实验的蛋白条带都连在一起
已经有37人回复
- 【求助/交流】western blot 缺带 断带
已经有21人回复
- 【分享】新手上路 Western blot问题集合
已经有6人回复
- 【求助/交流】western blot 显影后发现条带中空，求解答。
已经有8人回复
- 【求助/交流】纯化酶切后的膜蛋白做Western blot没条带，why？
已经有9人回复
- western blot 半干转膜后，发现条带个别缺失，不知道什么原因，请教各位
已经有1人回复
- 【求助/交流】western blot跑出的带高低不平
已经有3人回复
- 【求助/交流】western blot用奶粉封闭的原理
已经有18人回复
糖泡泡
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 934.2
- 散金: 39
- 帖子: 522
- 在线: 84.9小时
- 虫号: 816152
- 注册: 2009-07-26
- 性别: MM
- 专业: 化学生物学与生物有机化学
5楼2013-07-05 14:11:42
kx444555
至尊木虫 (正式写手)
- 应助: 56 (初中生)
- 贵宾: 1.326
- 金币: 10554.2
- 散金: 288
- 红花: 12
- 帖子: 820
- 在线: 238小时
- 虫号: 999718
- 注册: 2010-04-18
- 性别: GG
- 专业: 植物遗传学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, Gifts of roses, hand there are lingering fragrance. Look forward to your wonderful and more detailed answer. 2013-06-28 20:47:54
糖泡泡: 金币+3 2013-07-05 14:07:40
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, Gifts of roses, hand there are lingering fragrance. Look forward to your wonderful and more detailed answer. 2013-06-28 20:47:54
糖泡泡: 金币+3 2013-07-05 14:07:40
|
正面背面的问题，难道你的转膜有穿孔现象？可以换张另一批次的PVDF膜再做次看看， 杂带问题一般说来，先稀释样品，做个梯度，如果还有杂带，稀释一抗，做梯度，试试如何，再不行，投诉抗体公司，不是你的错 |
2楼2013-06-28 19:39:56
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 10
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
3楼2013-06-29 08:32:20
糖泡泡
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 934.2
- 散金: 39
- 帖子: 522
- 在线: 84.9小时
- 虫号: 816152
- 注册: 2009-07-26
- 性别: MM
- 专业: 化学生物学与生物有机化学
4楼2013-07-05 14:09:17
