版块导航: 正在加载中...

客户端APP下载

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

ccf水叮当

新虫 (小有名气)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 148.6
帖子: 263
在线: 21.4小时
虫号: 1330186
注册: 2011-06-24
专业: 水产基础生物学

[求助] 关于IRES-EGFP片段克隆

最近因为项目需要，在克隆IRES-EGFP片段，质粒来源于北京天恩泽公司，但是PCR出现很奇怪的现象。
问题描述：
1、起初引物能很好的扩增出片段，但是同样的实验条件后期就出不来任何条带，模板也是重新提取的新鲜质粒。
2、在获得的片段经过测序后发现上下游引物部分序列与原始序列相同，但中间有近600个bp是完全不对的，blast后发现是Gene-trapping transposon vector pUPATrap-TMat的片段，我用的是DH5α的大肠杆菌。

那有做过这个克隆的朋友，是否也遇到这样的问题？如何解决？谢谢啦~

» 猜你喜欢

矢车菊素-3-O-葡萄糖苷质控实录：从一张HPLC图谱读懂纯度与稳定性已经有0人回复
恩诺沙星（Enrofloxacin）科研解析：分子特征、LC-MS/MS 检测与实验室使用要点已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有234人回复
Calderasib理化性质与实验操作技术笔记已经有0人回复
RMC-6291怎么用？RAS(ON) 三重复合物工具化合物的实验室实操要点已经有0人回复
苯并呋咱全解析：NBD 荧光衍生化试剂母核的化学特性与实验室应用已经有0人回复
生物质炭与活化剂氢氧化钾混合注意事项已经有0人回复
科研人必读：新一代 KRAS G12C 抑制剂 Olomorasib 的研究进展已经有0人回复
BT-11（Omilancor）研究化合物全解析：从分子结构到实验应用要点已经有0人回复
富马酸贝达喹啉：二芳基喹啉类工具化合物的化学特征已经有0人回复
BT投稿with editor状态快两周了，正常吗已经有13人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

请问克隆表达时目的片段前多加了KOZAK序列会影响融合蛋白表达吗？已经有5人回复
长片段基因3.9K克隆不出来，求助已经有43人回复
功能基因克隆测序结果片段长度不一致！急求高手指导！已经有5人回复
Fosmid文库大片段的阳性克隆子筛选和测序问题已经有18人回复
如何根据保守序列将基因片段克隆出来已经有16人回复
如何设计引物扩增片段？做克隆的已经有11人回复
求助！大片段4kb左右基因PCR克隆方法已经有15人回复
大片段基因克隆已经有15人回复
克隆大片段的序列如何设计引物已经有4人回复
请问能不能仅克隆单一基因的一小片段已经有4人回复
重叠PCR克隆大片段已经有4人回复
【求助/交流】基因克隆实验为非目的片段？已经有27人回复

1楼 2013-06-27 21:31:58

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

ccf水叮当

新虫 (小有名气)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 148.6
帖子: 263
在线: 21.4小时
虫号: 1330186
注册: 2011-06-24
专业: 水产基础生物学

谢谢楼上啊！！

2楼2013-06-30 12:21:08

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

相关版块跳转我要订阅楼主 ccf水叮当的主题更新