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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 噬菌体文库PCR扩增扩不出片段
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xrj315

铜虫 (初入文坛)

[求助] 噬菌体文库PCR扩增扩不出片段 已有1人参与

噬菌体文库扩增前PCR很多长片段，扩增之后过了一段时间PCR长片段几乎没有（刚扩增完也还好），而且扩增出很多亮度很差的小片段，只有100~200左右，但可以确定不是引物二聚体，做过对照（第二张图），噬菌体的滴度没有变化。求大神指导，是我做法有问题还是都这种现象？

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噬菌体文库PCR扩增扩不出片段
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噬菌体文库PCR扩增扩不出片段-1
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左手挽着埃蒙斯，右手却被吉伦哈尔拖向了深渊......
1楼 2013-06-23 18:51:42
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linyingjia

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

我也有这个问题啊。噬菌体裂解液直接pcr也和你的第一个图差不多。我买的是millipore的pre made-t7 select噬菌体。
做到第4轮筛选后，挑取噬菌斑 顶层培养基，按照说明书做的，pcr没有出带。
只在100bp左右位置有印。

你的解决了嘛？
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2楼2014-04-25 21:56:22
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acast

新虫 (正式写手)
你好 楼主这个问题解决了吗
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"Hope"and"Wait"
3楼2015-11-18 01:28:16
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51mimi

新虫 (小有名气)
我也做噬菌体展示，但是你们的问题我怎么看不明白呢？是不是大家方法不同。

发自小木虫Android客户端
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4楼2015-11-18 09:10:18
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yujian6135

金虫 (小有名气)
您好。请问这个引物是根据那些基因设计的？我想做一下侵染大肠菌菌BL21的噬菌体基因鉴定，不知道怎么设计引物，麻烦指点一下。谢谢～～
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5楼2018-12-05 11:40:39
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