24小时热门版块排行榜    

查看: 1088  |  回复: 10

疯一样的自由

新虫 (初入文坛)

[求助] 【求助】蛋白纯化的问题

看到有文章说蛋白纯化步骤
将重组菌进行超声裂解之后,将存在可溶的目的蛋白的裂解液通过【纤维素膜】过滤后,再过层析柱。

【请问】通过纤维素膜过滤是过滤什么?蛋白不都吸附在纤维素膜了吗?

谢谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

不转录的DNA

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+4, 鼓励新虫发帖交流,欢迎常来! 2013-06-18 20:57:26
疯一样的自由: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-06-20 15:26:19
纤维素膜过滤是过滤掉不溶物质!如菌的细胞壁和细胞膜等物质!纤维素膜孔径大小不一致的,不知你的膜孔径多大,一般有0,22um和0.45um两种!可溶性蛋白是不会吸附在其上的!

也可以通过离心的方法除去沉淀,然后再过层析柱!
希望对你有用!
长得比我英俊的,没我有才华!有才华的,没我长得俊!
2楼2013-06-18 20:10:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
疯一样的自由: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-06-20 15:26:29
上柱子的样品最好先过滤,一般是用0.45μm的膜。否则大颗粒物容易堵塞柱子,对柱子的损伤大。
3楼2013-06-19 04:04:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

greety0918

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
一般是0.22微米的膜,主要是起到除菌以及细胞碎片等不溶物的作用
终于硕士毕业了,解放ing
5楼2013-06-19 15:21:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wolfman840

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
纤维素滤膜和一般除杂滤器不会吸附你的蛋白的,很多低蛋白吸附的滤膜都是纤维素的。离心的设备成本比较大,所以会推荐做过滤,现在你可以采用1μm的澄清过滤器来一步达到上柱所需的样品颗粒数。
6楼2013-06-19 15:30:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liu_chen_na

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
吸附蛋白的是NC膜,做Western时候的硝酸纤维素膜。
7楼2013-06-19 19:38:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

疯一样的自由

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 不转录的DNA at 2013-06-18 20:10:17
纤维素膜过滤是过滤掉不溶物质!如菌的细胞壁和细胞膜等物质!纤维素膜孔径大小不一致的,不知你的膜孔径多大,一般有0,22um和0.45um两种!可溶性蛋白是不会吸附在其上的!

也可以通过离心的方法除去沉淀,然后再 ...

明白了,十分感谢!
4楼2013-06-19 09:40:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

疯一样的自由

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by liu_chen_na at 2013-06-19 19:38:31
吸附蛋白的是NC膜,做Western时候的硝酸纤维素膜。

这俩不是一个货么
8楼2013-06-20 15:24:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liu_chen_na

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 疯一样的自由 at 2013-06-20 15:24:05
这俩不是一个货么...

对,后面一句话是对前面一句话的解释
9楼2013-06-20 15:56:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

疯一样的自由

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by liu_chen_na at 2013-06-20 15:56:56
对,后面一句话是对前面一句话的解释...

哦。。。看岔了。。。哈哈
10楼2013-06-20 16:12:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 疯一样的自由 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料与化工一志愿南昌大学327求调剂推荐 +5 Ncdx123456 2026-03-13 6/300 2026-03-15 23:39 by lovewei0727
[考研] 283求调剂 +6 小楼。 2026-03-12 9/450 2026-03-14 22:15 by cfxczx2015
[基金申请] 现在如何回避去年的某一个专家,不知道名字 +3 zk200107 2026-03-12 6/300 2026-03-14 17:13 by zk200107
[考研] 308 085701 四六级已过求调剂 +7 温乔乔乔乔 2026-03-12 14/700 2026-03-14 10:49 by JourneyLucky
[考研] 一志愿郑大070303,338分,求调剂 +4 dadawaf 2026-03-10 5/250 2026-03-14 01:20 by lsw010101
[基金申请] 有必要更换申报口吗 20+3 fannyamoy 2026-03-11 3/150 2026-03-14 00:52 by zhanghaozhu
[考研] 307求调剂 +7 超级伊昂大王 2026-03-10 7/350 2026-03-14 00:49 by JourneyLucky
[考研] 312求调剂 +6 陌宸希 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:40 by JourneyLucky
[考研] 26考研调剂 +3 ying123. 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:18 by JourneyLucky
[考研] 285 求调剂 资源与环境 一志愿北京化工大学 +3 未名考生 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:04 by JourneyLucky
[考研] 材料371求调剂 +9 鳄鱼? 2026-03-11 11/550 2026-03-13 22:53 by JourneyLucky
[考研] 337一志愿华南理工0805材料求调剂 +7 mysdl 2026-03-11 9/450 2026-03-13 22:43 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西南交大,材料专硕317求调剂 +5 lx8568 2026-03-11 5/250 2026-03-13 21:43 by peike
[考研] 293求调剂 +3 世界首富 2026-03-11 3/150 2026-03-13 16:27 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂(085602一志愿985) +12 化工人999 2026-03-09 12/600 2026-03-13 12:02 by JourneyLucky
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +3 d如愿上岸 2026-03-12 5/250 2026-03-13 10:56 by houyaoxu
[考研] 0817化学工程与技术考研312分调剂 +3 T123 tt 2026-03-12 3/150 2026-03-13 10:49 by houyaoxu
[考研] 08食品或轻工求调剂,本科发表3篇sci一区top论文,一志愿南师大食品科学与工程 +3 我是一个兵, 2026-03-10 3/150 2026-03-13 10:21 by Yuyi.
[考博] 26申博求助 +3 跳跃饼干 2026-03-10 4/200 2026-03-10 21:15 by Tntcnn
[考研] 0703化学调剂 +3 三dd. 2026-03-10 3/150 2026-03-10 15:45 by peike
信息提示
请填处理意见