24小时热门版块排行榜    

查看: 2024  |  回复: 13
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

xiaohong1213

银虫 (初入文坛)

[求助] 细胞破壁去除蛋白的方法

请教高手,打算细胞破壁后用高效液相测定胞内产物,但是考虑到蛋白太多,所以打算先去除蛋白,在检测。用2被体积的异丙醇沉淀后,去检测,却找不到我的胞内产物了。只有异丙醇的峰了。而之前我没有去除蛋白时,是有我的胞内产物的峰的。是不是异丙醇沉淀蛋白的方法不对啊 ?有没有其他可以沉淀蛋白的方法?谢谢啊
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaohong1213

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by edoz1986 at 2013-05-31 10:12:46
1.你如何检测你的目的蛋白表达了?
2.你用的是原始菌还是重组滴啊?
3.你确定你的目的蛋白没有沉淀下来?
4.应该是先纯化你的蛋白啊?

谢谢你如此有条理的提问。
1 目的蛋白的表达我做了SDS-PAGE。不过没测酶活。
2 液相用的是重组菌,没有问题的。
3 目的蛋白应该没有沉淀,之前用破壁上清液直接跑过液相,有产物,只是蛋白量太大,担心损坏柱子,所以打算先去一下蛋白。
4 如果要纯化蛋白该如何做呢?
非常感谢!!!
5楼2013-05-31 12:59:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

edoz1986

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你是破碎细胞后,去除一些杂蛋白后再上液相吗?
2楼2013-05-31 09:23:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaohong1213

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by edoz1986 at 2013-05-31 09:23:57
你是破碎细胞后,去除一些杂蛋白后再上液相吗?

嗯,是的。可能是我的目的胞内产物量比较小,破壁后2倍体积的异丙醇沉淀后,浓度太低了,所以无法检测到。请问有没有更好的去蛋白的办法?谢谢
3楼2013-05-31 10:01:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

edoz1986

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
xiaohong1213(myprayer代发): 金币+1, Send person rose fragrance in hand, thank you loosen one\\\'s purse strings generously, look forward to your wonderful 2013-05-31 10:47:06
xiaohong1213: 金币+9, ★★★很有帮助 2013-05-31 13:39:36
1.你如何检测你的目的蛋白表达了?
2.你用的是原始菌还是重组滴啊?
3.你确定你的目的蛋白没有沉淀下来?
4.应该是先纯化你的蛋白啊?
4楼2013-05-31 10:12:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 机械专硕325,寻找调剂院校 +3 y9999 2026-03-15 5/250 2026-03-16 19:58 by y9999
[考研] 333求调剂 +3 文思客 2026-03-16 7/350 2026-03-16 18:21 by 文思客
[考研] 材料与化工专硕调剂 +3 heming3743 2026-03-16 3/150 2026-03-16 15:05 by peike
[考研] 070303 总分349求调剂 +3 LJY9966 2026-03-15 5/250 2026-03-16 14:24 by xwxstudy
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-16 3/150 2026-03-16 10:07 by 求调剂zz
[教师之家] 焦虑 +7 水冰月月野兔 2026-03-13 9/450 2026-03-16 10:00 by Quakerbird
[考研] 085601材料工程315分求调剂 +3 yang_0104 2026-03-15 3/150 2026-03-15 10:58 by peike
[考研] 255求调剂 +3 李嘉慧, 2026-03-12 4/200 2026-03-14 16:58 by 有只狸奴
[考研] 307求调剂 +7 超级伊昂大王 2026-03-10 7/350 2026-03-14 00:49 by JourneyLucky
[考研] 311求调剂 +8 zchqwer 2026-03-10 8/400 2026-03-14 00:01 by JourneyLucky
[考研] 285 求调剂 资源与环境 一志愿北京化工大学 +3 未名考生 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:04 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +6 Mochaaaa 2026-03-12 7/350 2026-03-13 22:18 by 星空星月
[考研] 336求调剂 +6 Iuruoh 2026-03-11 6/300 2026-03-13 22:06 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西南交大,材料专硕317求调剂 +5 lx8568 2026-03-11 5/250 2026-03-13 21:43 by peike
[考研] 281求调剂 +9 Koxui 2026-03-12 11/550 2026-03-13 20:50 by Koxui
[硕博家园] 085600 260分求调剂 +3 天空还下雨么 2026-03-13 5/250 2026-03-13 18:46 by 天空还下雨么
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +8 困于星晨 2026-03-12 10/500 2026-03-13 15:42 by ms629
[考研] 274求调剂 +3 S.H1 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:15 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:30 by 求调剂zz
[考研] 0817化学工程与技术考研312分调剂 +3 T123 tt 2026-03-12 3/150 2026-03-13 10:49 by houyaoxu
信息提示
请填处理意见