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如何判断转染的细胞表达了自己想要的蛋白 已有2人参与
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老板让我求得pEGFP-N1质粒一枚，转染细胞成功，筛到了稳定株。 还未高兴完，老板让我把EGFP基因酶切掉，连进去自己的基因，以用于后续实验。希望可以单独表达这个基因所对应的蛋白，不要绿色荧光蛋白。 我不太明白，既然不要绿色荧光蛋白，干吗还让筛绿色荧光蛋白的稳定株？问原因，老板说让做对照。但是我还是搞不太明白呀，这样的对照也没意义呀？反正自己的样品中绿色荧光蛋白蛋白已经切掉了……这样的对照也没啥意义呀？大家说呢？ 这个先按下不表。 现在老板说想单独表达自己的蛋白，不希望跟绿色荧光蛋白融合表达。但是不知道怎么才能确定自己转染的细胞稳定表达了自己想要的蛋白呢？老板让我去查，我不知道该从哪里下手啊！所以恳求各位大侠指点。 还有一点，表达融合蛋白怎么了？不好吗？ 肯定各位指点了。谢谢谢谢……不胜感激……  |
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 【分子生物】EPI帖 |
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brightfuture01
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西瓜(金币+5, EPI+1): 言简意赅。Wester Blot和Real-time PCR都可以，不过WB更确切。 2011-06-18 10:10:47
西瓜(金币+5, EPI+1): 言简意赅。Wester Blot和Real-time PCR都可以，不过WB更确切。 2011-06-18 10:10:47
| 做WB检测。。。 |
2楼2011-06-17 18:55:34
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