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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 如何让绿色荧光蛋白在Hela细胞中表达
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夏日宝宝

铜虫 (初入文坛)

[求助] 如何让绿色荧光蛋白在Hela细胞中表达

各位大侠，我现在做的实验，差一个生物应用。我是想导入一个绿色荧光蛋白的基因片段到Hela细胞中，让其进行表达，从而观察到绿色荧光。不知道是不是可以直接把绿色荧光蛋白的sense导入细胞，孵育几天后就会自动表达了？
谢谢啦！
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1楼 2011-11-25 11:26:42
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sunqinyan

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

夏日宝宝(金币+10): 谢谢~ 2011-11-25 13:04:50
转染GFP的质粒就可以了
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2楼2011-11-25 11:32:38
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夏日宝宝

铜虫 (初入文坛)
那之后的孵育之类的，有什么特别的条件吗？质粒需要扩增吗？一般都是从哪购买啊？麻烦了！呵呵
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3楼2011-11-25 13:11:03
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sunqinyan

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 夏日宝宝 at 2011-11-25 13:11:03:
那之后的孵育之类的，有什么特别的条件吗？质粒需要扩增吗？一般都是从哪购买啊？麻烦了！呵呵

你是只要GFP蛋白在细胞内表达就可以是吗？
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4楼2011-11-25 16:54:42
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夏日宝宝

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by sunqinyan at 2011-11-25 16:54:42:
你是只要GFP蛋白在细胞内表达就可以是吗？

是的，或者是用反义基因，使它进入已经转染绿色荧光蛋白的细胞，从而阻止绿色荧光蛋白的表达~
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5楼2011-11-26 18:32:01
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jycloud

铁虫 (小有名气)
转GFP质粒到细胞中就可以,质粒哪里都有卖,很常见.转染后一般48-72小时就能表达.
然后设计段序列干扰以下绿色荧光蛋白就可以了,这部分实验有很多公司也提供服务,用带GFP反义序列的RNA干扰病毒感染细胞就可以沉默GFP的表达啦.
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猫猫
6楼2011-11-27 09:09:27
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