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dongxiao1214

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于荧光蛋白 已有2人参与

EGFP和RFP的荧光的强弱可以表示载体中的目的基因表达量的多少吗?如果能,用什么可以检测到呢?
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

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rainwander(金币+1):鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-13 17:32:41
融合基因就可以,用荧光显微镜神马的
但其实不是很直接啊~为何不用WB之类的来检测过表达量?
2楼2011-01-13 16:27:52
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dongxiao1214

新虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2011-01-13 16:27:52:
融合基因就可以,用荧光显微镜神马的
但其实不是很直接啊~为何不用WB之类的来检测过表达量?

我是想把mRNA的3'UTR的一段序列给连接到载体上,再把miRNA转入细胞,看是否能抑制mRNA的表达,鉴定已知的mRNA是不是转的miRNA的靶标。
3楼2011-01-13 19:32:51
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by dongxiao1214 at 2011-01-13 19:32:51:

我是想把mRNA的3'UTR的一段序列给连接到载体上,再把miRNA转入细胞,看是否能抑制mRNA的表达,鉴定已知的mRNA是不是转的miRNA的靶标。

GFP定量困难,为何不用luciferase载体,比如psiCHECK-2
4楼2011-01-13 20:51:08
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