| 查看: 1127 | 回复: 3 | ||
[求助]
荧光蛋白酶的制备方法
|
|
我想标记酶， 文献上的方法是这样的 1。将40mg的漆酶加入到1mlpbs中，再加入1.5mlCBS（碳酸盐缓冲液） 2.在另一只试管中加入一定量的FITC（荧光标记物）分散到0.3ml的CBS中 3.迅速将2步中的FITC加入到1步中的漆酶溶液中， 4.室温搅拌2h，再离心15min 5.用葡聚糖凝胶G-15洗去上层的悬浊液 6.得到FITC标记的漆酶，收集到3个试管中，于-20度保存 但是遇到3个问题就是： 2步中FITC一般对应于酶（不是抗体）的用量是多少 5步中一般情况FITC的来标记酶的时候要用到葡聚糖凝胶洗去酶上方的悬浮液，这是个大问题，具体怎样操作使用葡聚糖凝胶洗呢，网上的太多，不知道选取哪种，有做过的，给常用简单易行呗？十分感谢，在这里作揖了。 6步中的收集，到底什么时间收集的出来的是需要的蛋白质呢。 ps：这个凝聚糖凝胶到底要用什么泡，泡多久，有的是6h，有的是24h，到底听那个？ 期待您的回复 [ Last edited by xubuoshi on 2011-7-6 at 16:06 ] |
回复此楼» 本帖已获得的红花（最新10朵）
xubuoshi» 猜你喜欢
国自科送审了吗
已经有7人回复
-
收到国自然专家邀请后几年才会有本子送过来评
已经有5人回复
-
研究生做的很差，你们会让毕业吗？
已经有6人回复
-
26年博士申请自荐-电催化
已经有5人回复
-
2026博士或科研助理转27年博士
已经有5人回复
-
夜，静悄悄的
已经有4人回复
-
考博
已经有6人回复
-
一篇MDPI论文改变了学习工作和生活
已经有5人回复
-
26年申博自荐-计算机视觉
已经有4人回复
2楼2011-07-07 11:09:40
tyhjqxbz
主管区长 (文坛精英)
- 博学EPI: 178
- 应助: 220 (大学生)
- 贵宾: 31.322
- 金币: 140763
- 散金: 60553
- 红花: 888
- 沙发: 1020
- 帖子: 32994
- 在线: 3594.4小时
- 虫号: 782124
- 注册: 2009-05-29
- 专业: 能源化工
- 管辖: 注册执考区
3楼2011-07-09 09:28:57
4楼2011-07-09 14:35:31