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荧光蛋白酶的制备方法
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我想标记酶， 文献上的方法是这样的 1。将40mg的漆酶加入到1mlpbs中，再加入1.5mlCBS（碳酸盐缓冲液） 2.在另一只试管中加入一定量的FITC（荧光标记物）分散到0.3ml的CBS中 3.迅速将2步中的FITC加入到1步中的漆酶溶液中， 4.室温搅拌2h，再离心15min 5.用葡聚糖凝胶G-15洗去上层的悬浊液 6.得到FITC标记的漆酶，收集到3个试管中，于-20度保存 但是遇到3个问题就是： 2步中FITC一般对应于酶（不是抗体）的用量是多少 5步中一般情况FITC的来标记酶的时候要用到葡聚糖凝胶洗去酶上方的悬浮液，这是个大问题，具体怎样操作使用葡聚糖凝胶洗呢，网上的太多，不知道选取哪种，有做过的，给常用简单易行呗？十分感谢，在这里作揖了。 6步中的收集，到底什么时间收集的出来的是需要的蛋白质呢。 ps：这个凝聚糖凝胶到底要用什么泡，泡多久，有的是6h，有的是24h，到底听那个？ 期待您的回复 [ Last edited by xubuoshi on 2011-7-6 at 16:06 ] |
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