24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2096  |  回复: 13
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

xiaohong1213

银虫 (初入文坛)

[求助] 细胞破壁去除蛋白的方法

请教高手,打算细胞破壁后用高效液相测定胞内产物,但是考虑到蛋白太多,所以打算先去除蛋白,在检测。用2被体积的异丙醇沉淀后,去检测,却找不到我的胞内产物了。只有异丙醇的峰了。而之前我没有去除蛋白时,是有我的胞内产物的峰的。是不是异丙醇沉淀蛋白的方法不对啊 ?有没有其他可以沉淀蛋白的方法?谢谢啊
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

edoz1986

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
xiaohong1213(myprayer代发): 金币+1, Send person rose fragrance in hand, thank you loosen one\\\'s purse strings generously, look forward to your wonderful 2013-05-31 10:47:06
xiaohong1213: 金币+9, ★★★很有帮助 2013-05-31 13:39:36
1.你如何检测你的目的蛋白表达了?
2.你用的是原始菌还是重组滴啊?
3.你确定你的目的蛋白没有沉淀下来?
4.应该是先纯化你的蛋白啊?
4楼2013-05-31 10:12:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

edoz1986

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你是破碎细胞后,去除一些杂蛋白后再上液相吗?
2楼2013-05-31 09:23:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaohong1213

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by edoz1986 at 2013-05-31 09:23:57
你是破碎细胞后,去除一些杂蛋白后再上液相吗?

嗯,是的。可能是我的目的胞内产物量比较小,破壁后2倍体积的异丙醇沉淀后,浓度太低了,所以无法检测到。请问有没有更好的去蛋白的办法?谢谢
3楼2013-05-31 10:01:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaohong1213

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by edoz1986 at 2013-05-31 10:12:46
1.你如何检测你的目的蛋白表达了?
2.你用的是原始菌还是重组滴啊?
3.你确定你的目的蛋白没有沉淀下来?
4.应该是先纯化你的蛋白啊?

谢谢你如此有条理的提问。
1 目的蛋白的表达我做了SDS-PAGE。不过没测酶活。
2 液相用的是重组菌,没有问题的。
3 目的蛋白应该没有沉淀,之前用破壁上清液直接跑过液相,有产物,只是蛋白量太大,担心损坏柱子,所以打算先去一下蛋白。
4 如果要纯化蛋白该如何做呢?
非常感谢!!!
5楼2013-05-31 12:59:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 304求调剂(085602,过四级,一志愿985) +19 化工人999 2026-04-04 19/950 2026-04-07 12:48 by flydream1314
[考研] 一志愿吉大化学327求调剂 +8 王王白石 2026-04-06 9/450 2026-04-07 09:16 by 晴空210210
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +5 崔wj 2026-04-05 5/250 2026-04-06 15:40 by lin-da
[考研] 一志愿211生物学280分 求调剂 +5 李rien 2026-04-05 5/250 2026-04-06 10:30 by zhyzzh
[考研] 化学0703-一志愿211-338分求调剂 +8 vants 2026-04-05 8/400 2026-04-06 06:17 by houyaoxu
[考研] 工科08-机械专硕-求调剂 +3 雷欧飞踢 2026-04-02 3/150 2026-04-05 18:49 by 蓝云思雨
[考研] 电子信息调剂交叉学科有推荐吗 +6 jhtfeybgj 2026-04-01 9/450 2026-04-05 11:13 by 猪会飞
[考研] 333求调剂 +12 wfh030413@ 2026-04-03 13/650 2026-04-04 21:02 by jj987
[考研] 359求调剂 +7 hhhhaaaa$ 2026-04-04 7/350 2026-04-04 18:49 by imissbao
[考研] 一志愿华南师范361分,化学求调剂 +7 Nicole88888 2026-04-01 7/350 2026-04-04 18:28 by macy2011
[论文投稿] 求文献 5+3 ys879651$ 2026-04-02 3/150 2026-04-04 17:22 by bobvan
[考研] 一志愿中国石油大学化学工程323分求调剂 +4 化工专硕323分 2026-04-03 6/300 2026-04-03 22:12 by dongzh2009
[基金申请] esi高被引论文是不是能对中标有所加分和帮助呢 +5 redcom 2026-04-01 6/300 2026-04-03 15:15 by Howard28
[考研] 生物学硕341求调剂 +4 你笑起来像云朵 2026-04-03 4/200 2026-04-03 10:32 by macy2011
[考研] 08工科求调剂290分 +5 1314捧花 2026-04-02 8/400 2026-04-02 13:16 by 乔哒哒哒
[考研] 266求调剂 +4 学员97LZgn 2026-04-02 4/200 2026-04-02 13:03 by yulian1987
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358 +8 cs0106 2026-04-01 9/450 2026-04-02 10:36 by 不吃魚的貓
[考研] 279求调剂 +6 学而思兮知 2026-04-01 6/300 2026-04-02 09:16 by vgtyfty
[考研] 296求调剂 +4 汪!?! 2026-03-31 7/350 2026-04-01 22:04 by 客尔美德
[考研] 350求调剂 +7 阿佳~ 2026-03-31 7/350 2026-04-01 16:12 by yanflower7133
信息提示
请填处理意见