24小时热门版块排行榜    

查看: 2019  |  回复: 13
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

xiaohong1213

银虫 (初入文坛)

[求助] 细胞破壁去除蛋白的方法

请教高手,打算细胞破壁后用高效液相测定胞内产物,但是考虑到蛋白太多,所以打算先去除蛋白,在检测。用2被体积的异丙醇沉淀后,去检测,却找不到我的胞内产物了。只有异丙醇的峰了。而之前我没有去除蛋白时,是有我的胞内产物的峰的。是不是异丙醇沉淀蛋白的方法不对啊 ?有没有其他可以沉淀蛋白的方法?谢谢啊
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaohong1213

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by edoz1986 at 2013-05-31 09:23:57
你是破碎细胞后,去除一些杂蛋白后再上液相吗?

嗯,是的。可能是我的目的胞内产物量比较小,破壁后2倍体积的异丙醇沉淀后,浓度太低了,所以无法检测到。请问有没有更好的去蛋白的办法?谢谢
3楼2013-05-31 10:01:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

edoz1986

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你是破碎细胞后,去除一些杂蛋白后再上液相吗?
2楼2013-05-31 09:23:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

edoz1986

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
xiaohong1213(myprayer代发): 金币+1, Send person rose fragrance in hand, thank you loosen one\\\'s purse strings generously, look forward to your wonderful 2013-05-31 10:47:06
xiaohong1213: 金币+9, ★★★很有帮助 2013-05-31 13:39:36
1.你如何检测你的目的蛋白表达了?
2.你用的是原始菌还是重组滴啊?
3.你确定你的目的蛋白没有沉淀下来?
4.应该是先纯化你的蛋白啊?
4楼2013-05-31 10:12:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaohong1213

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by edoz1986 at 2013-05-31 10:12:46
1.你如何检测你的目的蛋白表达了?
2.你用的是原始菌还是重组滴啊?
3.你确定你的目的蛋白没有沉淀下来?
4.应该是先纯化你的蛋白啊?

谢谢你如此有条理的提问。
1 目的蛋白的表达我做了SDS-PAGE。不过没测酶活。
2 液相用的是重组菌,没有问题的。
3 目的蛋白应该没有沉淀,之前用破壁上清液直接跑过液相,有产物,只是蛋白量太大,担心损坏柱子,所以打算先去一下蛋白。
4 如果要纯化蛋白该如何做呢?
非常感谢!!!
5楼2013-05-31 12:59:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化学工程321分求调剂 +9 大米饭! 2026-03-15 12/600 2026-03-16 21:59 by 大米饭!
[考研] 东南大学364求调剂 +5 JasonYuiui 2026-03-15 5/250 2026-03-16 21:28 by 木瓜膏
[考研] 085600材料与化工 求调剂 +13 enenenhui 2026-03-13 14/700 2026-03-16 15:19 by 了了了了。。
[考研] 0703化学调剂 290分有科研经历,论文在投 +7 腻腻gk 2026-03-14 7/350 2026-03-16 10:12 by houyaoxu
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-16 3/150 2026-03-16 10:07 by 求调剂zz
[考研] 机械专硕调剂 +3 笨笨兔子 2026-03-12 3/150 2026-03-15 20:02 by 栗子粥?
[考研] 294求调剂 +3 Zys010410@ 2026-03-13 4/200 2026-03-15 10:59 by zhq0425
[考研] 265求调剂 +4 威化饼07 2026-03-12 4/200 2026-03-14 17:23 by userper
[考研] 331求调剂(0703有机化学 +5 ZY-05 2026-03-13 6/300 2026-03-14 10:51 by Jy?
[考研] 312求调剂 +6 陌宸希 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:40 by JourneyLucky
[考研] 311求调剂 +8 zchqwer 2026-03-10 8/400 2026-03-14 00:01 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +7 7712b 2026-03-13 7/350 2026-03-13 21:42 by peike
[考研] 315求调剂 +9 小羊小羊_ 2026-03-11 10/500 2026-03-13 21:13 by SXNU李老师
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-13 3/150 2026-03-13 20:41 by JourneyLucky
[考研] 工科278分求调剂 +5 周慢热啊 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:49 by JourneyLucky
[论文投稿] 投稿问题 5+4 星光灿烂xt 2026-03-12 6/300 2026-03-13 14:17 by god_tian
[考研] 085600 材料与化工 295 求调剂 +10 dream…… 2026-03-10 12/600 2026-03-12 13:46 by dream……
[基金申请] 提交后的基金本子,已让学校撤回了,可否换口子提交 +3 dut_pfx 2026-03-10 3/150 2026-03-11 08:38 by kudofaye
[考博] 26申博求助 +3 跳跃饼干 2026-03-10 4/200 2026-03-10 21:15 by Tntcnn
[硕博家园] 木虫好像不热闹了,是不是? +4 偏振片 2026-03-10 4/200 2026-03-10 09:51 by longwave
信息提示
请填处理意见