应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 90bp小片段的回收
171/2返回列表12下一页
查看: 2210  |  回复: 16
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

damo8912

铜虫 (初入文坛)

[求助] 90bp小片段的回收

90bp的片段胶回收检测什么也没有。回收试剂盒上写着小于400bp的加等凝胶体积的异丙醇，加异丙醇后明显能看到有沉淀析出，想问一下加异丙醇的作用是什么，还有那个沉淀是什么，还有回收这样的小片段有什么好的方法呢。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-05-25 14:40:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

hlwnxfd2011

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
damo8912(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-26 13:21:49
离心之后将收集管中的溶液重新加入吸附柱中再次离心，以增加得率。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2013-05-25 16:08:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anygene_seq

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-26 13:22:00
加入异丙醇就是为了沉淀析出，沉淀就是DNA，所有DNA都是不溶于异丙醇。建议你加入异丙醇，混匀后放入-20度静置30min，然后12000冷冻离心10min，去掉上清，用少量溶胶液洗涤管壁DNA，再反复过柱2次。应该能回收到，一般的胶回收柱对于小片段回收率都很低的。你还可以用桥式PCR试试，测序公司一般都是这样做的。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2013-05-25 22:35:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangpeng227

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-26 13:22:12
只要条带足够亮，按照试剂盒的步骤来就没问题。
电泳时胶浓度高一点，要确保条带大小是正确的。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2013-05-26 00:05:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小五来了

金虫 (小有名气)
★
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-26 13:22:20
小片段的DNA一般不都是用那个PAGE回收的吗，然后用无菌水洗脱差不多就可以了，好的可以达到十几纳克。
赞一下(1人) 回复此楼
没有最好，只有更好，珍惜生命，远离读研
6楼2013-05-26 08:32:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

光树林

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-26 13:22:30
我用的omega的回收试剂盒，回收155bp的片段。虽然电泳条带很弱，但是还是连接上了。所以看不到条带你可以连接试试

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下(1人) 回复此楼
一路向北
7楼2013-05-26 09:32:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

植物科研男

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-26 13:22:42
你用的是qigen的试剂盒吧。它最小的能回收100bp的条带，再小的话就直接从膜上离心下去了，所以得率非常低。它增对超小片段和超大片段还有两外一个kit，可以用那个试试。
赞一下(1人) 回复此楼
坚持就是胜利
8楼2013-05-26 12:05:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小五来了

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 光树林 at 2013-05-26 09:32:35
我用的omega的回收试剂盒，回收155bp的片段。虽然电泳条带很弱，但是还是连接上了。所以看不到条带你可以连接试试

这么小能回收得到？
赞一下(1人) 回复此楼
没有最好，只有更好，珍惜生命，远离读研
9楼2013-05-26 16:46:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wjzpwyz

铁虫 (正式写手)
直接用酚氯仿乙醇回收，比柱子效果好
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2013-05-26 18:44:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

光树林

木虫 (著名写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 小五来了 at 2013-05-26 16:46:25
这么小能回收得到？...

你试试就知道了。我连接转化都成功了
赞一下(1人) 回复此楼
一路向北
12楼2013-05-26 23:38:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

9号逐梦客

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我以前有用过一个GIQGEN的试剂盒，可以回收70bp以上的片段，你可以去看看，反正我用了是做出来了。好像天根也有小片段的回收试剂盒，你可以查查看。祝你好运啦
赞一下(1人) 回复此楼
为了梦想不断坚持在路上
13楼2013-05-27 08:29:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

damo8912

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hlwnxfd2011 at 2013-05-25 16:08:23
离心之后将收集管中的溶液重新加入吸附柱中再次离心，以增加得率。

恩 谢谢 我有这样做 水浴5min离心重吸再水浴5min离心
赞一下 回复此楼
3楼2013-05-25 22:32:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 damo8912 的主题更新
171/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 理学，工学，农学调剂，少走弯路，这里欢迎您！ +5 likeihood 2026-03-02 8/400 2026-03-02 20:39 by ji493940045
[考研] 0856材料调剂 +5 沿岸有贝壳OUC 2026-03-02 5/250 2026-03-02 20:31 by hypershenger
[考研] 环境调剂 +4 chenhanheng 2026-03-02 4/200 2026-03-02 20:23 by hypershenger
[考研] 材料复试调剂 +5 学材料的点 2026-03-01 6/300 2026-03-02 20:01 by hypershenger
[考研] 调剂 +3 13853210211 2026-03-02 3/150 2026-03-02 19:59 by hypershenger
[考研] 化工270求调剂 +9 什么名字qwq 2026-03-02 9/450 2026-03-02 19:31 by caszguilin
[考研] 275求调剂 +7 明远求学 2026-03-01 7/350 2026-03-02 19:22 by zhukairuo
[考研] 一志愿华南理工大学材料与化工326分，求调剂 +3 wujinrui1 2026-02-28 3/150 2026-03-02 16:36 by chuocheng
[考研] 化工专硕348，一志愿985求调剂 +6 弗格个 2026-02-28 9/450 2026-03-02 14:09 by liyongv
[考研] 求调剂 +3 熬夜的猫头鹰 2026-03-02 3/150 2026-03-02 11:45 by 刘兵
[考研] 295求调剂 +8 19171856320 2026-02-28 8/400 2026-03-02 11:19 by yuchj
[考研] 调剂 +3 13853210211 2026-03-02 4/200 2026-03-02 10:16 by 13853210211
[考研] 材料学调剂 +10 提神豆沙包 2026-02-28 12/600 2026-03-02 09:26 by 李老师！
[考研] 0857调剂 +4 一ll半 2026-02-28 5/250 2026-03-02 02:33 by 908055542
[基金申请] 本子写完了，给DS兄弟看了，得了92分 +3 Doma 2026-03-01 7/350 2026-03-02 00:00 by jnzsy
[基金申请] 成果系统访问量大，请一小时后再尝试。---NSFC啥时候好哦，已经两天这样了 +4 NSFC2026我来了 2026-02-28 4/200 2026-03-01 22:37 by 铁门栓
[考研] 290求调剂 +9 材料专硕调剂； 2026-02-28 11/550 2026-03-01 17:21 by sunny81
[考研] 寻找调剂 +4 LYidhsjabdj 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:56 by sunny81
[论文投稿] Optics letters投稿被拒求助 30+3 luckyry 2026-02-26 4/200 2026-03-01 09:06 by babero
[考研] 307求调剂 +4 73372112 2026-02-28 6/300 2026-03-01 00:04 by ll247
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭