关于目的基因不同向连接到T载体上的问题 - 分子生物 - 综合其他

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1楼 2013-05-24 23:35:32

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bonbonzd

木虫 (小有名气)

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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-28 10:34:27

会不会PCR产物就决定了，只有一个方向，taq酶导致只有3·端为A碱基，而T载体上也只有一端为T。“TA克隆方法（Original TA Cloning Kit）把PCR片断与一个具有3-T突出的载体DNA连接起来的方法。因为PCR反应中所适用的聚合酶具有末端转移的活性，通常在3加上A。例如：Taq聚合酶同时具有的末端连接酶的功能，PCR反应时在每条PCR扩增产物的3端自动添加一个3-A突出端。只有用经过特殊处理的具有3-T突出末端的DNA片断才能通过T/A配对进行连接。”所以，是不是就说TA克隆方法得到的，只能是一个方向的？