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nepwisil

禁虫 (小有名气)

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bonbonzd

木虫 (小有名气)

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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-05-28 10:34:27
会不会PCR产物就决定了,只有一个方向,taq酶导致只有3·端为A碱基,而T载体上也只有一端为T。“TA克隆方法(Original TA Cloning Kit)把PCR片断与一个具有3-T突出的载体DNA连接起来的方法。因为PCR反应中所适用的聚合酶具有末端转移的活性,通常在3加上A。例如:Taq聚合酶同时具有的末端连接酶的功能,PCR反应时在每条PCR扩增产物的3端自动添加一个3-A突出端。只有用经过特殊处理的具有3-T突出末端的DNA片断才能通过T/A配对进行连接。”所以,是不是就说TA克隆方法得到的,只能是一个方向的?
7楼2013-05-27 11:15:32
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-05-28 10:33:56
没有遇到过。虽然两个方向插入的比例往往不是1:1的,一般是有一个方向会多一些。你筛了多少克隆?
2楼2013-05-25 09:10:25
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阿树的秋天

铜虫 (初入文坛)

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myprayer: 金币+1, 感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-05-28 10:34:04
这个和你挑的有关系吧?T载与目的基因链接没有方向性的 我做的基因GC含量也比较高 但是没有出现楼主的问题
3楼2013-05-25 09:14:55
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nepwisil

禁虫 (小有名气)

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4楼2013-05-26 10:07:49
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