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原核表达问题
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ly320
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原核表达问题
最近在做原核表达,分段表达。全长已经在上清里面表达,N端却不能在上清表达,C端上清沉淀都没有表达。,已经摸过条件了。我想知道如果全长都可以在上清表达,那么N和C端是不是也应该可以在上清表达出来啊?
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2013-05-23 17:35:27
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2013-05-24 03:15:36
全长表达,单独的N端和C端却不见得能表达,我也遇到过类似情况,所谓能表达的都有一样的原因,不能表达的却各有各的不同,呵呵。这至少说明了你的蛋白当全长时才能正确折叠,N端和C端不可或缺,你可以试试N端向C端延伸一些,C端向N端延伸一些,再做克隆表达,仅供参考
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2楼
2013-05-23 20:09:11
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ly320(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助!
2013-05-24 03:15:45
有些蛋白质表达不完整,折叠不正确,就容易被降解或聚集形成包涵体.
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为什么
3楼
2013-05-23 23:13:19
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ly320
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2楼
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Originally posted by
meimeidou
at 2013-05-23 20:09:11
全长表达,单独的N端和C端却不见得能表达,我也遇到过类似情况,所谓能表达的都有一样的原因,不能表达的却各有各的不同,呵呵。这至少说明了你的蛋白当全长时才能正确折叠,N端和C端不可或缺,你可以试试N端向C端延 ...
谢谢,我准备换下载体试试
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4楼
2013-05-26 15:19:51
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