24小时热门版块排行榜    

查看: 1940  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

mnbgtrew

铜虫 (初入文坛)

[求助] 关于SDS-PAGE失败原因分析

用的浓缩胶5%,电压80V;分离胶15%,电压120V.中间几个是跑的几个小于5K的小分子,没跑出来我认了,但是边上那个二十多的怎么会偏离这么多?还有,这种条带是叫弥散还是叫拖尾呢,有什么方法可以减缓,求指点。
关于SDS-PAGE失败原因分析
2013-05-19 20 时 23 分.gif
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

学习交流
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
跑SDS-PAGE样品和marker不要离那么远,而且中间的泳道会比较好。最边上本身也容易跑歪。此外,你的5kD的蛋白最好用tricine胶跑,普通的SDS-PAGE在这么分子量小的区域会比较模糊,分辨率比较差。
4楼2013-05-20 01:46:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

kx444555

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1。依照经验15%的分离胶是估计跑不出5K的,还需加大浓度,
2。最后泳道离MARKER比较远,胶有时在跑时会发热变形,差不多位置是对的,
3。个人觉得21K下的条带应该是降解的条带,建议在纯化过程或其它过程中加蛋白抑制剂试试看,
星陈代谢
2楼2013-05-19 22:45:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gwh775

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你的Marker怎么都跑的那么难看,是不是你的配胶的原料(母液,分离胶buffer,浓缩胶buffer,等)及跑胶缓冲液有问题?
虽然压力大,但路还是要走下去
3楼2013-05-19 22:55:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mnbgtrew

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by kx444555 at 2013-05-19 22:45:23
1。依照经验15%的分离胶是估计跑不出5K的,还需加大浓度,
2。最后泳道离MARKER比较远,胶有时在跑时会发热变形,差不多位置是对的,
3。个人觉得21K下的条带应该是降解的条带,建议在纯化过程或其它过程中加蛋白 ...

谢谢,那个21K的是纯的木瓜蛋白酶。你是说跑出那个位置是合理的,如果放的离Marker近一点就会正常是吗?还有,有哪些蛋白抑制剂可以加啊,我没加过,加进去不是也会对出现相对的蛋白条带对结果产生影响吗?
学习交流
5楼2013-05-20 11:30:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-08-31 21:30 by xiangy672
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 能否申诉? +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
信息提示
请填处理意见