| 查看: 2881 | 回复: 24 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
lushuiw银虫 (正式写手)
|
[求助]
T载体克隆做不出来，求帮助
|
|
| 各位战友们，lz在做目的基因与T载体连接，之后转化到DH5α感受态，然后涂板，结果长的特别密，挑到液体培养基摇菌，都是澄清的。大家谁知道是怎么回事呀，做了好长时间了。 |
回复此楼» 猜你喜欢
生物质炭与活化剂氢氧化钾混合注意事项
已经有0人回复
-
科研人必读：新一代 KRAS G12C 抑制剂 Olomorasib 的研究进展
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有188人回复
-
BT-11（Omilancor）研究化合物全解析：从分子结构到实验应用要点
已经有0人回复
-
富马酸贝达喹啉：二芳基喹啉类工具化合物的化学特征
已经有0人回复
-
BT投稿with editor状态快两周了，正常吗
已经有25人回复
-
Silevertinib（BDTX-1535）结构拆解：炔基双环片段为何成为合成瓶颈
已经有0人回复
-
RO4929097 解析：双苯并氮杂䓬骨架与 Notch 通路实验设计要点
已经有0人回复
-
分子量 1157 的 PROTAC 怎么配不析出：SGK3-PROTAC1 的溶解、分装与图谱复核
已经有0人回复
-
logP 6.1 的羧酸怎么配母液：GSK 650394 的溶解窗口与稀释顺序
已经有0人回复
-
从"水不溶"到 71 mg/mL：雷特格韦的 pH 依赖溶解与螯合色谱边界
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- T-A克隆一直做不出来
已经有28人回复
- 克隆做不出来，求帮助
已经有19人回复
- 目的基因连接到克隆载体后提取质粒测序，序列有问题
已经有11人回复
- 克隆时做酶切，只切载体还是连要插入载体的片段也要酶切呢？
已经有7人回复
- pcr产物胶回收浓度低，能不能和T载体连接
已经有16人回复
- 我有几个克隆和基因重组的基本问题不太清楚，请各位帮帮忙！
已经有6人回复
- 最近做T克隆都是阴性，怎么回事？
已经有14人回复
- 求助：亚克隆做不出来
已经有5人回复
- 平末端连接做不出来克隆
已经有30人回复
- PMD19-T载体连接不上428bp的片段
已经有20人回复
- T载体连接目的片段后做蓝白斑全都是假阳性
已经有6人回复
- 已知全长基因怎样克隆并构建表达载体
已经有8人回复
- 【求助】基因克隆T载体酶切问题等
已经有8人回复
- puf酶与普通Taq酶混用PCR问题
已经有22人回复
- PCR产物与T载体连不上 求助
已经有29人回复
- 克隆基因和载体连接后转化至大肠杆菌，为什么每次涂板都是空平板没有菌落？
已经有17人回复
- 【求助/交流】大肠杆菌有的是表达载体的宿主，有些事克隆载体的宿主，他们的区别在哪�
已经有10人回复
- 【求助/交流】为什么我的PCR产物总是连接不上T载体
已经有26人回复
- 【求助/交流】急！克隆快做了一个月了，就是做不出来
已经有24人回复
- 【求助/交流】关于PCR的问题
已经有18人回复
sunnyboylg
木虫 (正式写手)
- 应助: 20 (小学生)
- 金币: 3020.2
- 红花: 4
- 帖子: 469
- 在线: 110.3小时
- 虫号: 2348227
- 注册: 2013-03-15
- 性别: GG
- 专业: 植物病理学
4楼2013-05-19 11:04:32
wxf8470
木虫 (小有名气)
- 应助: 15 (小学生)
- 金币: 1437.5
- 散金: 100
- 帖子: 195
- 在线: 200.7小时
- 虫号: 869514
- 注册: 2009-10-12
- 性别: GG
- 专业: 神经生物学
2楼2013-05-19 08:45:36
wangqi1107
银虫 (小有名气)
- 应助: 57 (初中生)
- 金币: 194.3
- 红花: 2
- 帖子: 122
- 在线: 121.7小时
- 虫号: 995882
- 注册: 2010-04-13
- 专业: 生物大分子结构与功能
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
lushuiw(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-19 10:21:46
lushuiw: 金币+2 2013-05-19 14:10:04
amisking: 回帖置顶 2013-05-19 19:55:17
lushuiw: 金币+3 2013-05-20 21:51:55
感谢参与，应助指数 +1
lushuiw(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-19 10:21:46
lushuiw: 金币+2 2013-05-19 14:10:04
amisking: 回帖置顶 2013-05-19 19:55:17
lushuiw: 金币+3 2013-05-20 21:51:55
| 第一做阴性对照，看是否你的抗生素是否污染了；第二，检测你的感受态细胞不转化连接产物，直接涂板，看是否污染了。第三，放一个空板，看是否倒的培养基有污染。第四，同时做一个阳性对照。再做一个连接产物转化感受态。这五个板要同时做。然后看看结果，一定能检测出来哪里出了问题。 |
3楼2013-05-19 09:44:55
静安jingan
铁杆木虫 (职业作家)
- 应助: 86 (初中生)
- 贵宾: 0.932
- 金币: 9295.7
- 散金: 2894
- 红花: 43
- 沙发: 28
- 帖子: 4233
- 在线: 1412.1小时
- 虫号: 2005883
- 注册: 2012-09-16
- 性别: MM
- 专业: 免疫相关疾病其他科学问题
5楼2013-05-19 13:01:30
