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sunzhengwang

铁虫 (小有名气)


[交流] PCR 条带很淡

按照论文给的条件做CCN-1基因的PCR,结果发现条带很淡,
根本看不出来差异,
给位虫友,请帮忙指点一下,或者给点自己这方面的经验
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)


★ ★
sunzhengwang(金币+1): 谢谢参与
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-21 00:37:41
论文里引物的PCR条件只能做参考。具体条件要根据实验室的条件和试剂进一步优化。
2楼2013-05-15 09:59:55
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★ ★
sunzhengwang(金币+1): 谢谢参与
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-21 00:38:03
3楼2013-05-15 10:12:52
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whb21

木虫 (著名写手)


★ ★
sunzhengwang(金币+1): 谢谢参与
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-21 00:38:10
建议楼主调整退火温度和引物浓度
4楼2013-05-15 10:46:44
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weiyasong

木虫 (著名写手)



sunzhengwang(金币+1): 谢谢参与
论文里引物的PCR条件只能做参考。具体条件要根据实验室的条件和试剂进一步优化。
5楼2013-05-15 10:49:55
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匿名

用户注销 (小有名气)



sunzhengwang(金币+1): 谢谢参与
本帖仅楼主可见
6楼2013-05-15 19:14:55
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

neu234

木虫之王 (文学泰斗)



sunzhengwang(金币+1): 谢谢参与
赞一个
7楼2013-05-15 21:04:49
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sunnyboylg

木虫 (正式写手)



sunzhengwang(金币+1): 谢谢参与
论文里引物的PCR条件只能做参考,一般就调高或者调低退火温度
8楼2013-05-15 22:32:50
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妮妮风

新虫 (小有名气)


★ ★
sunzhengwang(金币+1): 谢谢参与
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-21 00:38:30
也可以考虑延长延伸时间。。。还有就是模板浓度
10楼2013-05-17 18:19:28
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denghengning

铁虫 (初入文坛)


★ ★
sunzhengwang(金币+1): 谢谢参与
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-21 00:38:41
引用回帖:
4楼: Originally posted by whb21 at 2013-05-15 10:46:44
建议楼主调整退火温度和引物浓度

还可以增加循环次数。如果综合以上几点都未能解决的话,那就是模板与引物的匹配不够好,建议重新设计引物、、、、、
11楼2013-05-20 23:20:36
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简单回复
2013-05-15 22:48   回复  
sunzhengwang(金币+1): 谢谢参与
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