24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 1040  |  回复: 2

转基因猴子

木虫 (正式写手)

[求助] 质粒提取过程中出现颗粒状物质

酶切片段连接pET28a转化JM109涂布LBK平板,单菌落很多,但是挑取单菌落摇瓶提质粒的时候出现问题。我用的是OMEGA的小提质粒试剂盒,在加完Solution2之后,并没有像正常情况变得很澄清,在加完solution3离心之后,白色物质看上去像是颗粒状,并不是正常的细胞壁和蛋白碎片那种感觉。提出来的质粒酶切验证跑胶什么东西都木有。第一次碰到这种情况,青教各位虫子是为何?
PS: 1试剂盒是新开封的。
2 我们实验室几个提质粒的同时出现了这个情况
3 提取空载体的时候没有这种情况,一切正常

那么,我觉得可能原因如下:
1 感受态细胞有问题,但是重新做过一次还是这种情况,难道我们的感受态细胞被污染了?可能性不大。
2以前做连接转化的时候单菌落并不会有这么多,这次多到像是在转质粒。不知为何?当时还很高兴,长了那么多,没想到是这么个问题。
求教!!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

我还年轻,我要上路!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
转基因猴子(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-08 02:07:20
转基因猴子: 金币+4 2013-05-08 08:42:10
提质粒前可以做下菌落PCR,选取含有目的基因的阳性克隆再提质粒。此外,如果觉得提质粒的盒子有问题可以自己配溶液提一两个看看。如果加溶液2不澄清说明菌裂解不好。
2楼2013-05-08 00:13:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
转基因猴子: 金币+15 2013-05-08 08:42:04
看上去有污染源. 你可以养一管以前你自己保存的glycerol stock, 下次提质粒的时候带上, 如果这一管正常说明试剂盒没有问题. 剩下的问题查你的板, 培养液, 抗生素.
3楼2013-05-08 03:51:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 转基因猴子 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085408光电信息工程专硕355一志愿长春光机所调剂 +6 王ymaa 2026-04-13 13/650 2026-04-14 11:33 by 王ymaa
[考研] 求助调剂,跨调 +16 X十甫寸Y 2026-04-11 17/850 2026-04-14 10:59 by 不我拉绿卡
[考研] 26药学专硕105500求调剂 +5 喽哈加油 2026-04-13 5/250 2026-04-14 10:15 by 求调剂zz
[考研] 085600材料与化工349分求调剂 +16 李木子啊哈哈 2026-04-12 17/850 2026-04-14 09:11 by fenglj492
[考研] 085404 298分求调剂 +11 呼啦呼啦呼呼呼 2026-04-10 12/600 2026-04-14 08:38 by wfj257
[考研] 各位老师好,求调剂,本科211,一志愿天津大学生物与医药学硕,差两名录取。 +10 路六六jjj 2026-04-13 10/500 2026-04-14 07:08 by babysonlkd
[考研] 271求调剂 +34 2261744733 2026-04-11 40/2000 2026-04-13 23:15 by pies112
[考研] 材料299专硕求调剂 +13 +21 2026-04-09 13/650 2026-04-13 14:16 by 张zhihao
[考研] 材料考研调剂 +29 云木达达 2026-04-11 31/1550 2026-04-13 13:32 by lyh鲁老师
[考研] 339求调剂 +4 hanwudada 2026-04-12 4/200 2026-04-13 12:03 by 蓝云思雨
[材料工程] 材料调剂推荐 +9 蛋糕x2 2026-04-07 9/450 2026-04-13 09:07 by lhj2009
[考研] 322求调剂,08工科 +4 今天是个小号 2026-04-08 4/200 2026-04-13 00:20 by baobaoye
[考研] +10 李多米lee. 2026-04-12 11/550 2026-04-12 22:58 by yuyin1233
[考研] 291求调剂 +8 关忆北. 2026-04-11 8/400 2026-04-12 09:32 by 逆水乘风
[考研] 求调剂,262机械专硕 +8 嗯yyl 2026-04-08 8/400 2026-04-12 02:31 by 秋豆菜芽
[考研] 材料与化工300求调剂 +39 肖开文 2026-04-09 43/2150 2026-04-12 01:30 by 秋豆菜芽
[考研] 调剂 +5 文道星台 2026-04-11 5/250 2026-04-11 15:01 by 凯凯要变帅
[考研] 298求调剂 +13 钉叮咚冬瓜 2026-04-09 13/650 2026-04-10 15:49 by jiajinhpu
[考研] 已调剂 +18 柴郡猫_ 2026-04-09 19/950 2026-04-09 22:10 by 柴郡猫_
[考研] 331求调剂 +5 luoxin0706. 2026-04-08 5/250 2026-04-08 22:15 by zhouyuwinner
信息提示
请填处理意见