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转基因猴子

木虫 (正式写手)

应助: 15 (小学生)
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虫号: 450786
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性别: GG
专业: 生物化学

[求助] 质粒提取过程中出现颗粒状物质

酶切片段连接pET28a转化JM109涂布LBK平板，单菌落很多，但是挑取单菌落摇瓶提质粒的时候出现问题。我用的是OMEGA的小提质粒试剂盒，在加完Solution2之后，并没有像正常情况变得很澄清，在加完solution3离心之后，白色物质看上去像是颗粒状，并不是正常的细胞壁和蛋白碎片那种感觉。提出来的质粒酶切验证跑胶什么东西都木有。第一次碰到这种情况，青教各位虫子是为何？
PS: 1试剂盒是新开封的。
2 我们实验室几个提质粒的同时出现了这个情况
3 提取空载体的时候没有这种情况，一切正常

那么，我觉得可能原因如下：
1 感受态细胞有问题，但是重新做过一次还是这种情况，难道我们的感受态细胞被污染了？可能性不大。
2以前做连接转化的时候单菌落并不会有这么多，这次多到像是在转质粒。不知为何？当时还很高兴，长了那么多，没想到是这么个问题。
求教！！

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我还年轻，我要上路！

1楼 2013-05-07 10:16:35

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