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转基因猴子木虫 (正式写手)
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质粒提取过程中出现颗粒状物质
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酶切片段连接pET28a转化JM109涂布LBK平板,单菌落很多,但是挑取单菌落摇瓶提质粒的时候出现问题。我用的是OMEGA的小提质粒试剂盒,在加完Solution2之后,并没有像正常情况变得很澄清,在加完solution3离心之后,白色物质看上去像是颗粒状,并不是正常的细胞壁和蛋白碎片那种感觉。提出来的质粒酶切验证跑胶什么东西都木有。第一次碰到这种情况,青教各位虫子是为何? PS: 1试剂盒是新开封的。 2 我们实验室几个提质粒的同时出现了这个情况 3 提取空载体的时候没有这种情况,一切正常 那么,我觉得可能原因如下: 1 感受态细胞有问题,但是重新做过一次还是这种情况,难道我们的感受态细胞被污染了?可能性不大。 2以前做连接转化的时候单菌落并不会有这么多,这次多到像是在转质粒。不知为何?当时还很高兴,长了那么多,没想到是这么个问题。 求教!! |
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cicelyzh
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