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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于提取真菌DNA的方法
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可乐7红茶

银虫 (正式写手)

[求助] 关于提取真菌DNA的方法 已有1人参与

最近打算做真菌的分子鉴定，首先要提DNA，但是上网查了一些资料，发现方法各有不同，不知道有没有做过的同学能推荐一个简单有效的方法。还有，不用液氮研磨行不行，能用其他代替吗？
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1楼 2013-05-03 17:14:01
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回帖置顶 ( 共有1个 )

樱落夕

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-10-29 16:41:42
gyesang: 回帖置顶 2013-10-29 16:42:08
1、CTAB提取缓冲液的经典配方
CTAB为十六烷基三甲基溴化铵， Tris-HCl (pH8.0)提供一个缓冲环境,防止核酸被破坏； EDTA螯合Mg2+或Mn2+离子,抑制DNase活性； NaCl 提供一个高盐环境,使DNP充分溶解,存在于液相中； Cβ-巯基乙醇是抗氧化剂,有效地防止酚氧化成醌,避免褐变,使酚容易去除基因组DNA。 CTAB        4g NaCl         16.364 g 1M Tris-HCl 20ml( PH8.0) 0.5M EDTA 8ml，先用70ml ddH2O溶解, 再定容至200ml
高温高压灭菌 提取时再加0.2-1% 2-巯基乙醇（400ul）或PVP 2g（1%）。
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8楼2013-10-25 13:30:58
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普通回帖

liyu0355

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
可乐7红茶(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖交流经验！ 2013-05-03 18:02:43
我们实验室都是液氮研磨,试剂盒提取.


真菌细胞被不好破的哟.
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2楼2013-05-03 17:25:58
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liyu0355

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
可乐7红茶(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-03 18:02:55
内容已删除
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3楼2013-05-03 17:29:21
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可乐7红茶

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liyu0355 at 2013-05-03 17:25:58
我们实验室都是液氮研磨,试剂盒提取.


真菌细胞被不好破的哟.

没有试剂盒，打算用改良的CTAB法，有谁知道3% CTAB提取缓冲液怎么配制啊？
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4楼2013-05-04 18:21:45
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可乐7红茶

银虫 (正式写手)
5楼2013-05-05 10:30:52
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可乐7红茶

银虫 (正式写手)
6楼2013-05-06 09:26:50
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张小逸

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liyu0355 at 2013-05-03 17:25:58
我们实验室都是液氮研磨,试剂盒提取.


真菌细胞被不好破的哟.

请问你，使用的是什么试剂盒？蘑菇类真菌呢？谢谢
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7楼2013-10-25 11:12:55
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mj-bio

新虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
9楼2014-07-28 13:59:06
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scofield111

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liyu0355 at 2013-05-03 17:25:58
我们实验室都是液氮研磨,试剂盒提取.


真菌细胞被不好破的哟.

请问液氮研磨可以代替么，试剂盒用的是哪个呢，谢谢啊
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10楼2015-06-08 10:06:35
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