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关于提取真菌DNA的方法 已有1人参与
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| 最近打算做真菌的分子鉴定，首先要提DNA，但是上网查了一些资料，发现方法各有不同，不知道有没有做过的同学能推荐一个简单有效的方法。还有，不用液氮研磨行不行，能用其他代替吗？ |
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 分子生化实验经验积累 |
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liyu0355
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1、CTAB提取缓冲液的经典配方 CTAB为十六烷基三甲基溴化铵， Tris-HCl (pH8.0)提供一个缓冲环境,防止核酸被破坏； EDTA螯合Mg2+或Mn2+离子,抑制DNase活性； NaCl 提供一个高盐环境,使DNP充分溶解,存在于液相中； Cβ-巯基乙醇是抗氧化剂,有效地防止酚氧化成醌,避免褐变,使酚容易去除基因组DNA。 CTAB 4g NaCl 16.364 g 1M Tris-HCl 20ml( PH8.0) 0.5M EDTA 8ml，先用70ml ddH2O溶解, 再定容至200ml 高温高压灭菌 提取时再加0.2-1% 2-巯基乙醇（400ul）或PVP 2g（1%）。 |
8楼2013-10-25 13:30:58
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9楼2014-07-28 13:59:06
scofield111
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