应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】氯化苄方法提取真菌DNA
51/1返回列表
查看: 1964  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

ntbp

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】氯化苄方法提取真菌DNA 已有3人参与

做了5遍了，还是提不出来，提出来的也是RNA。恳求做过的同学给我一份实验步骤，不胜感激。
另溶解DNA时双蒸水和TE溶解有何差别？多谢大家！！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-06-11 10:05:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yituyitu

木虫 (正式写手)
就用ctab法，我提了上千个了，没问题。。。
赞一下 回复此楼
2楼2010-06-11 13:46:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaopo

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
可以参考安徽农业大学李旻2006年的硕士论文中的DNA提取方法。我用的都是他 的方法，效果比较好
赞一下(1人) 回复此楼
努力一点
3楼2011-03-10 20:48:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaopo

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
可以使用一下的DNA提取方法：称取0.05g~0.1g冻干菌丝放入1.5ml eppendorf管中，加入300ml抽取液（100mMTris.HCl,pH 9.0；40mM EDTA，pH 8.0），充分振荡混匀后加入100ml 10％SDS、300ml氯化苄。振荡混匀后放入50℃水浴1小时，每隔10分钟振荡混合一次。加入300ul NaAC（pH 5.2）混匀，冰浴15分钟，4℃下6000rpm离心15分钟。离心完成后取出吸取上清液至一新eppendorf管中，加入5ul 10mg/ul RNA酶后放于37℃水浴保温1小时。加入等体积酚氯仿异戊醇（25:24:1），反复振荡混匀后12000g离心10分钟，结束后取出吸取上清液至一新管中，重复此步骤一次。向取出的上清液中加入氯仿异戊醇，反复振荡后12000g离心10分钟，吸出上清液，重复此步骤一次。向上清液中加入1/10体积3M NaAC，再加入等体积冷异戊醇，轻轻上下转动，放入4℃冰箱20分钟或者过夜，使DNA能够充分沉淀。12000g离心15分钟，取出倒去液体，将沉淀用80％冷乙醇漂洗两次，空干15分钟后溶于100ul TE溶液中。溶液保存于－20℃备用。
赞一下(1人) 回复此楼
努力一点
4楼2011-03-10 20:51:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

强悍的阿Q

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
同学你的氯化苄方法提出来了吗？ 我的很模糊，可是文献上别人的很亮。
赞一下 回复此楼
5楼2014-05-26 21:35:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ntbp 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 系统今天又提示维护了，估计离放榜不远了 +12 winnerche 2026-07-29 16/800 2026-08-04 08:18 by Equinoxhua
[有机交流] 一个有机合成实验室都需要哪些设备？ 50+3 kf2781974 2026-07-31 10/500 2026-08-04 08:05 by 88817753
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 jRl3mE6ddZGq 2026-08-03 9/450 2026-08-04 07:46 by k7OM8YghWbkC
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 13/650 2026-08-04 07:30 by k7OM8YghWbkC
[教师之家] 基础研究怎么拉横向，学校到款任务越来越多，难以完成 拉横向，都有哪些途径啊 +9 锦衣卫寒战 2026-07-28 13/650 2026-08-04 07:21 by Ermito
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 jRl3mE6ddZGq 2026-08-03 8/400 2026-08-04 06:15 by k7OM8YghWbkC
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 6/300 2026-08-04 06:10 by k7OM8YghWbkC
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 9/450 2026-08-04 06:07 by k7OM8YghWbkC
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 jRl3mE6ddZGq 2026-08-03 4/200 2026-08-04 04:54 by k7OM8YghWbkC
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jRl3mE6ddZGq 2026-08-03 6/300 2026-08-04 04:47 by k7OM8YghWbkC
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 8/400 2026-08-04 04:46 by k7OM8YghWbkC
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 7/350 2026-08-04 04:46 by k7OM8YghWbkC
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 8/400 2026-08-04 03:21 by k7OM8YghWbkC
[高分子] UV压敏胶开发 +3 ichall 2026-07-30 5/250 2026-08-03 14:40 by Sunrisepay
[基金申请] 面上提前没消息，有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 16/800 2026-08-03 12:23 by fuweiguochen
[基金申请] 2026年国自然面上资助率 +16 布布和一二 2026-07-30 22/1100 2026-08-03 09:20 by gy116024
[基金申请] 微信指数没变化，科研之友没阅读 +15 wangze12014 2026-07-28 19/950 2026-08-02 20:05 by 蔡棒棒菂
[考博] 2027年申博 50+3 射雕英雄胜 2026-07-30 3/150 2026-08-02 09:36 by lfy8008
[高分子] HXDI做水性聚氨酯乳液，是不是特别容易出渣 15+3 yuyusuv 2026-07-29 3/150 2026-07-31 09:21 by huizingga
[基金申请] 你们的时间戳变了吗 +3 archvillain 2026-07-30 4/200 2026-07-30 18:53 by levinzhwen
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭