| 查看: 1757 | 回复: 4 | |||
[交流]
【求助/交流】氯化苄方法提取真菌DNA 已有3人参与
|
|
做了5遍了，还是提不出来，提出来的也是RNA。恳求做过的同学给我一份实验步骤，不胜感激。 另溶解DNA时双蒸水和TE溶解有何差别？多谢大家！！！ |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有169人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 环境样品地下水中细菌总DNA的提取方法
已经有23人回复
- 求助——真菌DNA提取
已经有11人回复
- 真菌基因组DAN提取图片，求高人指点
已经有20人回复
- 快崩溃了，提个DNA 有这么难吗？
已经有18人回复
- 丝状真菌提取总DNA问题
已经有14人回复
- 【求助/交流】怎么做都提不出DNA，请高手帮一下忙喽！！！！
已经有52人回复
- 【求助/交流】DNA提取方法（用于PCR-DGGE）
已经有20人回复
- 【求助/交流】提取真菌DNA或RNA一定要液氮研磨吗？
已经有7人回复
- 【求助/交流】真菌提DNA的方法
已经有8人回复
- 【求助/交流】急！ 帮忙分析下CTAB法提取真菌DNA的电泳图
已经有4人回复
- 【求助/交流】请大家推荐提取真菌DNA的试剂盒
已经有8人回复
yituyitu
木虫 (正式写手)
- 应助: 17 (小学生)
- 金币: 3923.1
- 散金: 53
- 红花: 12
- 帖子: 797
- 在线: 121.2小时
- 虫号: 483519
- 注册: 2007-12-26
- 专业: 微生物资源与分类学
2楼2010-06-11 13:46:49
zhaopo
木虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 6296.2
- 散金: 50
- 红花: 1
- 帖子: 785
- 在线: 133.9小时
- 虫号: 794685
- 注册: 2009-06-15
- 性别: GG
- 专业: 病原真菌学
3楼2011-03-10 20:48:13
zhaopo
木虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 6296.2
- 散金: 50
- 红花: 1
- 帖子: 785
- 在线: 133.9小时
- 虫号: 794685
- 注册: 2009-06-15
- 性别: GG
- 专业: 病原真菌学
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
| 可以使用一下的DNA提取方法：称取0.05g~0.1g冻干菌丝放入1.5ml eppendorf管中，加入300ml抽取液（100mMTris.HCl,pH 9.0；40mM EDTA，pH 8.0），充分振荡混匀后加入100ml 10％SDS、300ml氯化苄。振荡混匀后放入50℃水浴1小时，每隔10分钟振荡混合一次。加入300ul NaAC（pH 5.2）混匀，冰浴15分钟，4℃下6000rpm离心15分钟。离心完成后取出吸取上清液至一新eppendorf管中，加入5ul 10mg/ul RNA酶后放于37℃水浴保温1小时。加入等体积酚氯仿异戊醇（25:24:1），反复振荡混匀后12000g离心10分钟，结束后取出吸取上清液至一新管中，重复此步骤一次。向取出的上清液中加入氯仿异戊醇，反复振荡后12000g离心10分钟，吸出上清液，重复此步骤一次。向上清液中加入1/10体积3M NaAC，再加入等体积冷异戊醇，轻轻上下转动，放入4℃冰箱20分钟或者过夜，使DNA能够充分沉淀。12000g离心15分钟，取出倒去液体，将沉淀用80％冷乙醇漂洗两次，空干15分钟后溶于100ul TE溶液中。溶液保存于－20℃备用。 |
4楼2011-03-10 20:51:49
5楼2014-05-26 21:35:02
