24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1307  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

梦锁深秋2005

银虫 (小有名气)


[交流] 片段连接失败

我是556bp的片段,连接在PUC19的质粒上,用的KpnⅠ和BamHⅠ双酶切,转化涂板后质粒粗提精提均比原始质粒高一点,但PCR验证、酶切验证均没有条带,只有一些二聚体,求解释!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

20083630zhan

木虫 (正式写手)


★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
梦锁深秋2005(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-03 18:06:47
我觉得你应该在酶切回收之后先跑一个电泳看看,你到底是否会受到目的片段,然后再连接,因为有的是后你回收的产物太少,或者是根本没有会受到,
4楼2013-05-03 16:49:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

gzl9901

铁杆木虫 (文坛精英)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
祝福,,祝福祝福,,努力,再努力!再创佳绩!
2楼2013-05-03 14:48:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

意孤城_

金虫 (正式写手)


★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
梦锁深秋2005(gyesang代发): 金币+2, good, 同时需要减少酶切模板的量,保证载体双酶切干净哦! 2013-05-03 18:06:33
gyesang: 回帖置顶 2013-05-03 18:06:38
转化涂板后质粒粗提精提均比原始质粒高一点  什么意思?没切出来就说明片段没有连接进去,能提出来是载体自连的原因,建议酶切载体的时候加大酶切时间,保证切干净,同时做个阴性对照,不加片段,让载体自连看看和实验组的差距,如果长得一样多,那就不能用
3楼2013-05-03 16:41:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangqi1107

银虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
图片发过来看看,高一点事什么意思?
5楼2013-05-03 16:57:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703一志愿9,初试成绩:338,四六级已过,有科研经历,求调剂! +6 Zuhui0306 2026-03-25 6/300 2026-03-30 16:31 by nothing投稿中
[考研] 329求调剂,一志愿西北工业大学,材料工程(085601) +5 小小机灵虫 2026-03-29 11/550 2026-03-30 15:02 by Wang200018
[考研] 070300化学354求调剂 +7 101次希望 2026-03-28 7/350 2026-03-30 13:22 by Iveryant
[考研] 085701求调剂初试286分 +5 secret0328 2026-03-28 5/250 2026-03-30 12:54 by fangnagu
[考研] 材料工程专硕求调剂 +6 hyl3153942 2026-03-29 6/300 2026-03-30 12:04 by 1018329917
[考研] 298求调剂 +3 种圣赐 2026-03-29 3/150 2026-03-29 12:06 by longlotian
[硕博家园] 招收生物学/细胞生物学调剂 +4 IceGuo 2026-03-26 5/250 2026-03-29 01:25 by griffith2014
[考研] 0856,材料与化工321分求调剂 +12 大馋小子 2026-03-27 13/650 2026-03-28 10:56 by self2008
[考研] 328求调剂 +7 嗯滴的基本都 2026-03-27 7/350 2026-03-28 04:19 by fmesaito
[考研] 085701环境工程求调剂 +9 多久上课 2026-03-27 9/450 2026-03-28 03:58 by fmesaito
[考研] 08开头275求调剂 +4 拉谁不重要 2026-03-26 4/200 2026-03-27 14:12 by Delta2012
[考研] 085601 材料工程 313分 求调剂 +5 Ong3 2026-03-27 5/250 2026-03-27 12:24 by goldfish51
[考研] 298调剂 +3 jiyingjie123 2026-03-27 3/150 2026-03-27 11:57 by wxiongid
[考研] 调剂 +3 李嘉图·S·路 2026-03-27 3/150 2026-03-27 11:19 by wangjy2002
[考研] 0703化学一志愿南京师范大学303求调剂 +3 zzffylgg 2026-03-24 3/150 2026-03-27 10:42 by shangxh
[考研] 一志愿河工大 081700 276求调剂 +4 地球绕着太阳转 2026-03-23 4/200 2026-03-26 14:27 by zzll406
[考研] 求b区院校调剂 +4 周56 2026-03-24 5/250 2026-03-25 17:12 by yishunmin
[考研] 302求调剂 +4 锦衣卫藤椒 2026-03-25 4/200 2026-03-25 16:29 by 功夫疯狂
[考研] 300分,材料,求调剂,英一数二 +5 超赞的 2026-03-24 5/250 2026-03-24 21:07 by 星空星月
[考研] 化工专硕求调剂 +3 question挽风 2026-03-24 3/150 2026-03-24 18:48 by jhhcooi
信息提示
请填处理意见