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SaII和BamHI双酶切切不开
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zhuqinjian
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专业: 微生物遗传育种学
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SaII和BamHI双酶切切不开
我用T载体与目的片段连接后,导入JM109中,用菌落PCR也能P出目的片段,提取质粒后PCR也能P出来,电泳跑出来的片段也正确(环状片段跑出来有3条带),但是用SaII和BamHI双酶切就是切不出来,只有一条带。求大神指导啊?是不是只是单酶切了啊?为啥双酶切切不出来呢?
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【求助/交流】大家有没有用过Xba 1 和 BamH 1我怎么切不开啊~~急~
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坚定方向,坚持下去
1楼
2013-05-02 08:44:56
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stevenshi021
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专业: 生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhuqinjian: 金币+5,
★
有帮助, 单酶切做了下,发现Sal I没有切开,哎不知道怎么回事
2013-05-02 11:01:09
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助!
2013-05-02 12:01:23
分别做单切,确定是那个酶不能工作!此外,PCR的鉴定时候是否有加入阴性与阳性对照,我想担心你所看到的片段是都就是目的片段!希望对你有用!
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2楼
2013-05-02 10:20:52
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