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yhdchina

新虫 (初入文坛)

[交流] 纯化的蛋白溶液(EK buffer中)怎样确定是否是目的蛋白与纯度 已有3人参与

我用Ni离子亲和层析纯化融合蛋白,标签在载体端,然后用EK酶将载体切开,纯化得到我的目的多肽(约4.2KDa),Tricine-SDS-PAGE电泳只有目的条带。想看一下是不是我的目的多肽,并且看它的纯度有多少。哪位知道用什么方法做,哪个公司做的比较好?谢谢!
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Greatben

银虫 (小有名气)

研发工程师



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你看,可不可以用用反相色谱测纯度,MS,或者测序
2楼2013-04-20 08:05:27
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yhdchina

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Greatben at 2013-04-20 08:05:27
你看,可不可以用用反相色谱测纯度,MS,或者测序

现在的液质联用技术是什么作用,纯度与目的序列能不能一块出来?
3楼2013-04-21 09:55:14
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
直接将你的样品用质谱测定核质比峰,从质谱图上就能显示出个样品的丰度。
4楼2013-04-21 11:46:47
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lhp6278

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
精确用HPLC可以测纯度,简单的用BCA、Lowrry、Broadford等方法测下就好了。是不是你的目的多肽测序比较靠谱
5楼2013-04-21 20:36:47
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