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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 纯化的蛋白溶液（EK buffer中）怎样确定是否是目的蛋白与纯度
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yhdchina

新虫 (初入文坛)

[交流] 纯化的蛋白溶液（EK buffer中）怎样确定是否是目的蛋白与纯度 已有3人参与

我用Ni离子亲和层析纯化融合蛋白，标签在载体端，然后用EK酶将载体切开，纯化得到我的目的多肽（约4.2KDa），Tricine-SDS-PAGE电泳只有目的条带。想看一下是不是我的目的多肽，并且看它的纯度有多少。哪位知道用什么方法做，哪个公司做的比较好？谢谢！
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1楼 2013-04-19 15:01:11
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
直接将你的样品用质谱测定核质比峰，从质谱图上就能显示出个样品的丰度。
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4楼2013-04-21 11:46:47
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Greatben

银虫 (小有名气)

研发工程师
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你看，可不可以用用反相色谱测纯度，MS，或者测序
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2楼2013-04-20 08:05:27
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yhdchina

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Greatben at 2013-04-20 08:05:27
你看，可不可以用用反相色谱测纯度，MS，或者测序

现在的液质联用技术是什么作用，纯度与目的序列能不能一块出来？
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3楼2013-04-21 09:55:14
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lhp6278

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
精确用HPLC可以测纯度，简单的用BCA、Lowrry、Broadford等方法测下就好了。是不是你的目的多肽测序比较靠谱
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5楼2013-04-21 20:36:47
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