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铜虫 (初入文坛)

[求助] 带有精氨酸及尿素的变性蛋白如何纯化？

我的蛋白在大肠杆菌中以包涵体形式表达，用带有0.4M精氨酸及尿素的溶液可以将包涵体溶解，单纯尿素效果一般，现在我想讲该变性蛋白溶液纯化后再复性，但是不知道该采用哪种树脂，感觉高PH的精氨酸溶液很难选择树脂啊，有没有好的建议呢？

1楼 2012-09-11 16:35:17

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银虫 (小有名气)

请问下楼主，精氨酸助溶的原理是什么啊？

2楼2012-09-13 16:15:34

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铜虫 (初入文坛)

引用回帖:

2楼: Originally posted by 小兵pp at 2012-09-13 16:15:34
请问下楼主，精氨酸助溶的原理是什么啊？

我也不太清楚我也就是看了文献试一下结果发现精氨酸助溶效果很好

3楼2012-09-14 09:14:46

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木虫 (小有名气)

★ ★
wizardfan: 金币+2, 非常详细的回答 2012-09-16 06:04:42

精氨酸可以抑制蛋白形成聚集体，一般复性的时候喜欢加。楼主说单纯尿素溶解效果比较差，可否用盐酸胍溶解呢？想纯化后复性，问楼主可以带标签吗？标签方便纯化。不加标签也可以，一般包涵体的量比较大，楼主用低浓度尿素多洗几次也可以达到很好的纯度。再复性后换成一般缓冲液离子交换或SIZE试试。

4楼2012-09-15 15:55:53

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