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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 带有精氨酸及尿素的变性蛋白如何纯化？
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laughfjy

铜虫 (初入文坛)

[求助] 带有精氨酸及尿素的变性蛋白如何纯化？

我的蛋白在大肠杆菌中以包涵体形式表达，用带有0.4M精氨酸及尿素的溶液可以将包涵体溶解，单纯尿素效果一般，现在我想讲该变性蛋白溶液纯化后再复性，但是不知道该采用哪种树脂，感觉高PH的精氨酸溶液很难选择树脂啊，有没有好的建议呢？
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1楼 2012-09-11 16:35:17
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小兵pp

银虫 (小有名气)
请问下楼主，精氨酸助溶的原理是什么啊？
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2楼2012-09-13 16:15:34
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laughfjy

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小兵pp at 2012-09-13 16:15:34
请问下楼主，精氨酸助溶的原理是什么啊？

我也不太清楚 我也就是看了文献试一下 结果发现精氨酸助溶效果很好
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3楼2012-09-14 09:14:46
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ynkuaile

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
wizardfan: 金币+2, 非常详细的回答 2012-09-16 06:04:42
精氨酸可以抑制蛋白形成聚集体，一般复性的时候喜欢加。楼主说单纯尿素溶解效果比较差，可否用盐酸胍溶解呢？想纯化后复性，问楼主可以带标签吗？标签方便纯化。不加标签也可以，一般包涵体的量比较大，楼主用低浓度尿素多洗几次也可以达到很好的纯度。再复性后换成一般缓冲液离子交换或SIZE试试。
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4楼2012-09-15 15:55:53
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