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laughfjy

铜虫 (初入文坛)

[求助] 带有精氨酸及尿素的变性蛋白如何纯化?

我的蛋白在大肠杆菌中以包涵体形式表达,用带有0.4M精氨酸及尿素的溶液可以将包涵体溶解,单纯尿素效果一般,现在我想讲该变性蛋白溶液纯化后再复性,但是不知道该采用哪种树脂,感觉高PH的精氨酸溶液很难选择树脂啊,有没有好的建议呢?
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ynkuaile

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
wizardfan: 金币+2, 非常详细的回答 2012-09-16 06:04:42
精氨酸可以抑制蛋白形成聚集体,一般复性的时候喜欢加。楼主说单纯尿素溶解效果比较差,可否用盐酸胍溶解呢?想纯化后复性,问楼主可以带标签吗?标签方便纯化。不加标签也可以,一般包涵体的量比较大,楼主用低浓度尿素多洗几次也可以达到很好的纯度。再复性后换成一般缓冲液离子交换或SIZE试试。
4楼2012-09-15 15:55:53
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